DB1302/T 448-2016 鸡蛋中金刚烷胺的测定 液相色谱串联质谱法

​​DB1302/T 448-2016《鸡蛋中金刚烷胺的测定 液相色谱串联质谱法》主要内容总结​​

​​1. 标准概述​​

• ​​标准性质​​：唐山市地方标准，由唐山市质量技术监督局提出，唐山市农牧局归口，唐山市畜牧水产品质量监测中心起草。
• ​​适用范围​​：适用于鸡蛋中金刚烷胺（一种违禁抗病毒药物）残留量的测定。
• ​​方法原理​​：基于高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术，结合固相萃取（SPE）净化，实现高灵敏度和高特异性的检测。

​​2. 规范性引用文件​​

• 主要引用GB/T 6682《分析实验室用水规则和试验方法》，要求实验用水为一级水。

​​3. 样品制备​​

• ​​保存与运输​​：样品需在4℃以下保存和运输，一周内完成处理。
• ​​制样步骤​​：去壳后混合均匀，确保样品代表性。

​​4. 试剂与材料​​

• ​​关键试剂​​：
  • 色谱纯有机溶剂（甲醇、乙腈、正己烷）。
  • 三氯乙酸溶液（1%）用于提取。
  • 金刚烷胺标准品（纯度≥99%），配置成1 mg/mL储备液（-18℃保存）和100 ng/mL工作液（4℃保存）。
• ​​固相萃取柱​​：苯磺酸型（150 mg/6 mL）。
• ​​滤膜​​：0.22 μm有机系滤膜。

​​5. 仪器设备​​

• ​​核心设备​​：
  • LC-MS/MS（电喷雾离子源，ESI）。
  • 分析天平（精度0.01 mg）、离心机（≥6000 r/min）、氮吹仪、涡旋混合器。
• ​​色谱柱​​：Hypersil GOLD Silica（100 mm×2.1 mm，1.9 μm）。

​​6. 测定步骤​​

​​6.1 提取​​

• 称取2 g样品，加入甲醇-1%三氯乙酸溶液（1:1），涡旋振荡20 min，离心后合并上清液。

​​6.2 净化​​

• ​​SPE柱活化​​：甲醇、水、2%甲酸溶液。
• ​​上样与淋洗​​：提取液过柱后，用2%甲酸和甲醇淋洗。
• ​​洗脱​​：5%氨化甲醇洗脱，氮吹浓缩后流动相定容，过滤上机。

​​6.3 基质标准溶液制备​​

• 阴性样品经相同步骤处理，用于配制标准曲线，消除基质效应。

​​6.4 仪器条件​​

• ​​液相色谱​​：
  • 流动相：0.1%甲酸水（A）:乙腈（B）=2:3，流速0.25 mL/min。
  • 柱温40℃，进样量5 μL。
• ​​质谱参数​​：
  • 正离子模式（ESI+），多反应监测（MRM）。
  • 金刚烷胺母离子m/z 152.1，定量子离子135.5，碰撞能量28 V。

​​6.5 定性与定量​​

• ​​定性​​：保留时间偏差±2.5%，离子丰度偏差符合标准要求（如K>50时允许±20%）。
• ​​定量​​：外标法，基质标准曲线拟合。

​​6.6-6.8 质量控制​​

• 平行试验、空白试验、回收率试验（添加浓度2~50 μg/kg）。

​​7. 结果计算​​

• 公式：

  X = c /times /frac{V}{m} /times /frac{1000}{1000}

  • X：残留量（μg/kg）；c：标准曲线浓度（ng/mL）；V：定容体积（mL）；m：样品质量（g）。

​​8. 方法性能​​

• ​​灵敏度​​：检测限（LOD）0.5 μg/kg，定量限（LOQ）1.0 μg/kg。
• ​​准确度与精密度​​：
  • 回收率88.2%~93.0%，相对标准偏差（RSD）2.24%~7.13%（见附录B）。

​​附录​​

• ​​附录A​​：金刚烷胺的MRM色谱图（总离子流、定量/定性离子色谱图）。
• ​​附录B​​：回收率数据（添加水平2、10、50 μg/kg）。

​​关键点总结​​

1. ​​技术核心​​：LC-MS/MS结合SPE净化，确保高选择性和低检测限。
2. ​​质量控制​​：通过基质匹配标准、平行试验和回收率验证方法可靠性。
3. ​​应用价值​​：为鸡蛋中金刚烷胺残留监管提供标准化检测方法，保障食品安全。