DB1302/T 471-2017 柑橘类水果中橘红2号的测定 液相色谱串联质谱法

DB1302/T 471-2017《柑橘类水果中橘红2号的测定 液相色谱串联质谱法》主要内容总结​​

​​1. 标准概述​​

• ​​标准性质​​：唐山市地方标准，由唐山市质量技术监督局提出，唐山市农牧局归口，唐山市畜牧水产品质量监测中心起草。
• ​​适用范围​​：适用于鲜柑橘类水果中橘红2号（Citrus Red 2，CAS: 6358-53-8）残留量的测定。
• ​​方法原理​​：样品经乙腈提取，NH₂固相萃取柱净化后，通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测，外标法定量。

​​2. 关键步骤与技术要求​​

​​2.1 试剂与材料​​

• ​​主要试剂​​：甲醇、乙腈（色谱纯）、甲酸、乙酸乙酯、氯化钠。
• ​​标准品​​：橘红2号标准品（纯度≥99%），需配制储备液（1 mg/mL）、中间液（10 μg/mL）和工作液（100 ng/mL）。
• ​​固相萃取柱​​：NH₂柱（500 mg，6 mL），用于净化。

​​2.2 仪器设备​​

• ​​核心设备​​：LC-MS/MS（电喷雾离子源ESI）、分析天平（0.00001 g精度）、离心机（≥6000 r/min）、旋转蒸发仪、涡旋混合器等。
• ​​色谱柱​​：Shimadzu ODS-III C18柱（100 mm×2.1 mm，1.6 μm）。

​​2.3 样品制备​​

• 样品均质后冷冻保存，称取4 g样品，用乙腈提取，氯化钠盐析，离心后取上清液浓缩。

​​2.4 净化步骤​​

• 提取液经NH₂柱净化，甲醇活化后，用乙酸乙酯-甲醇（9:1）淋洗，收集流出液浓缩，70%乙腈定容，过0.22 μm滤膜。

​​2.5 色谱与质谱条件​​

• ​​液相色谱​​：
  • 流动相：A（0.1%甲酸水溶液）、B（乙腈），梯度洗脱（表1）。
  • 流速0.3 mL/min，柱温40℃，进样量5 μL。
• ​​质谱参数​​：
  • 正离子扫描（ESI+），多反应监测（MRM），雾化温度500℃。
  • 橘红2号母离子m/z 309.3，定量子离子m/z 153.3（DP 96 V，CE 23 V）。

​​2.6 定性与定量​​

• ​​定性​​：保留时间偏差±2.5%，离子丰度偏差符合表3要求（如K>50时允许±20%偏差）。
• ​​定量​​：外标法，基质标准曲线定量，线性范围内计算残留量。

​​2.7 方法验证​​

• ​​灵敏度​​：检出限0.5 μg/kg。
• ​​回收率与精密度​​：
  • 添加浓度1、10、20 μg/kg时，回收率87.5%~91.1%，精密度（RSD）3.02%~5.99%（表4）。

​​3. 质量控制要求​​

• ​​平行试验​​：同一样品需平行测定。
• ​​空白试验​​：全程空白以排除干扰。
• ​​回收率试验​​：阴性样品加标验证方法准确性。

​​4. 结果计算​​

• 公式：X=mc×V×f​×10001000​
  • X：残留量（μg/kg）；c：标准曲线浓度（ng/mL）；V：定容体积（mL）；m：样品质量（g）。

​​5. 附录​​

• ​​色谱图​​：包括总离子流图（图A.1）、定量离子（m/z 153.3，图A.2）和定性离子（m/z 277.9，图A.3）色谱图。

​​总结​​

本标准详细规定了柑橘类水果中橘红2号残留的LC-MS/MS检测方法，涵盖样品前处理、仪器参数、方法验证及数据处理，具有高灵敏度（0.5 μg/kg）和良好的准确性（回收率>87%），适用于食品安全监管中的痕量色素残留分析。