超清版 GB/T 44617-2024 饲料中庆大霉素的测定 液相色谱-串联质谱法
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- 标准类型：农牧渔类
- 标准语言：中文版
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- 更新时间：2025-03-18
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资料介绍
饲料中庆大霉素的测定
液相色谱-串联质谱法
Determination of gentamycin in feeds—
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
ICS 65.120
CCS B 46
中华人民共和国国家标准
GB/T 44617—2024
2024-09-29 发布2025-04-01 实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会发 布
前 言
本文件按照GB/T 1.1－2020《标准化工作导则 第1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规
定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC 76）提出并归口。
本文件起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、四川威尔检测技术股份有限公
司、北京工商大学、通威农业发展有限公司。
本文件主要起草人：索德成、郑玲燕、张凤枰、樊霞、陈刚、安志新、张璐、冯玉超、肖志明、
王石、吴金玉、董鹏、张航俊、姚婷、唐建。
GB/T 44617—2024
Ⅰ
饲料中庆大霉素的测定
液相色谱-串联质谱法
1 范围
本文件描述了用液相色谱﹘串联质谱法测定饲料中庆大霉素的原理、试剂或材料、仪器设备、样
品、试验步骤、试验数据处理。
本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中庆大霉素（以庆大霉素C1、
庆大霉素C1a、庆大霉素C2 和庆大霉素C2a 之和计）的测定。
本文件庆大霉素的检出限为0.030 mg/kg，定量限为0.100 mg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文
件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用
于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 20195 动物饲料 试样的制备
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原理
试样中的庆大霉素用5% 三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用液相色谱﹘串
联质谱仪测定，基质匹配标准曲线校准，外标法定量。
5 试剂或材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
5.1 水：GB/T 6682，一级。
5.2 甲酸铵：色谱纯。
5.3 甲酸：色谱纯。
5.4 甲醇：色谱纯。
5.5 乙腈：色谱纯。
5.6 0.1% 甲酸溶液：取1.0 mL 甲酸（5.3）, 用水稀释至1 000 mL，混匀。
5.7 0.1% 甲酸乙腈溶液：取1.0 mL 甲酸（5.3），用乙腈稀释至1 000 mL，混匀。
5.8 10% 氨水甲醇溶液：取氨水10 mL，用甲醇（5.4）稀释至100 mL，混匀。
5.9 1% 七氟丁酸酐甲酸溶液：取七氟丁酸酐0.5 mL，用0.1% 甲酸溶液（5.6）稀释至50 mL，混匀。
临用现配。
GB/T 44617—2024
1
5.10 2 mol/L 甲酸铵溶液：称取甲酸铵（5.2）12.6 g，用水溶解并稀释至1 000 mL，混匀。
5.11 甲酸铵﹘甲酸溶液：取2 mol/L 甲酸铵溶液（5.10）1 mL、甲酸（5.3）1 mL，用水稀释至
1 000 mL，混匀。
5.12 5% 三氯乙酸溶液：称取三氯乙酸5 g、乙二胺四乙酸二钠0.15 g，加水溶解并稀释至100 mL，
混匀。
5.13 硫酸庆大霉素（Gentamicin sulfate，CAS 号：1405﹘41﹘0）标准品：参考《中华人民共和国药
典》关于硫酸庆大霉素规定要求。参考标准品数值如下：纯度89.8%±5.0%。其中C1 组分含量为
29.5%，C1a 组分含量为19.8%，C2 与C2a 组分含量为50.7%。不同生产厂家的标准品各组分含量可能
不同。也可以采用相应单组分标准品。
5.14 庆大霉素标准储备溶液（以四种庆大霉素组分之和计，100 μg/mL）：称取硫酸庆大霉素标准品
适量（精确至0.01 mg），用水溶解，转移至100 mL 容量瓶，定容，混匀，配制成100 μg/mL 的庆大霉
素标准溶液（其中庆大霉素C1 组分为29.5 μg/mL，庆大霉素C1a 组分为19.8 μg/mL，庆大霉素
C2+C2a 组分为50.7 μg/mL）。－18 ℃ 以下贮存，有效期6 个月。或采用标准物质/标准样品。
5.15 庆大霉素标准中间溶液（10 μg/mL）：准确移取标准储备溶液（5.14）10 mL，用水稀释、定容
至100 mL，混匀。临用现配。
5.16 庆大霉素标准系列溶液：准确移取标准中间溶液（5.15）适量，用1% 七氟丁酸酐甲酸溶液
（5.9）稀释、定容，混匀，配制成质量浓度分别为5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、
200 ng/mL、500 ng/mL（其中庆大霉素C1 组分为1.475 ng/mL、2.95 ng/mL、14.75 ng/mL、
2 9 . 5 n g / m L 、5 9 . 0 n g / m L 、1 4 7 . 5 n g / m L ；庆大霉素C1a 组分为0 . 9 9 n g / m L 、1 . 9 8 n g / m L 、
9.90 ng/mL、19.0 ng/mL、39.6 ng/mL、99 ng/mL；庆大霉素C2+C2a 组分为2.535 ng/mL、
5.07 ng/mL、25.35 ng/mL、50.7 ng/mL、101.4 ng/mL、253.5 ng/mL）的标准工作液，置4℃ 冰箱
中避光保存。现用现配。
5.17 混合型阳离子交换固相萃取小柱：以苯磺酸化的聚苯乙烯﹘二乙烯基苯高聚物为填料，60 mg/
3 mL，或性能相当者。
5.18 微孔滤膜：0.22 μm，有机系。
6 仪器设备
6.1 液相色谱﹘串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
6.2 分析天平：精度分别为0.1 mg 和0.01 mg。
6.3 离心机：转速不低于8 000 r/min。
6.4 超
液相色谱-串联质谱法
Determination of gentamycin in feeds—
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
ICS 65.120
CCS B 46
中华人民共和国国家标准
GB/T 44617—2024
2024-09-29 发布2025-04-01 实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会发 布
前 言
本文件按照GB/T 1.1－2020《标准化工作导则 第1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规
定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC 76）提出并归口。
本文件起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、四川威尔检测技术股份有限公
司、北京工商大学、通威农业发展有限公司。
本文件主要起草人：索德成、郑玲燕、张凤枰、樊霞、陈刚、安志新、张璐、冯玉超、肖志明、
王石、吴金玉、董鹏、张航俊、姚婷、唐建。
GB/T 44617—2024
Ⅰ
饲料中庆大霉素的测定
液相色谱-串联质谱法
1 范围
本文件描述了用液相色谱﹘串联质谱法测定饲料中庆大霉素的原理、试剂或材料、仪器设备、样
品、试验步骤、试验数据处理。
本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中庆大霉素（以庆大霉素C1、
庆大霉素C1a、庆大霉素C2 和庆大霉素C2a 之和计）的测定。
本文件庆大霉素的检出限为0.030 mg/kg，定量限为0.100 mg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文
件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用
于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 20195 动物饲料 试样的制备
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原理
试样中的庆大霉素用5% 三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用液相色谱﹘串
联质谱仪测定，基质匹配标准曲线校准，外标法定量。
5 试剂或材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
5.1 水：GB/T 6682，一级。
5.2 甲酸铵：色谱纯。
5.3 甲酸：色谱纯。
5.4 甲醇：色谱纯。
5.5 乙腈：色谱纯。
5.6 0.1% 甲酸溶液：取1.0 mL 甲酸（5.3）, 用水稀释至1 000 mL，混匀。
5.7 0.1% 甲酸乙腈溶液：取1.0 mL 甲酸（5.3），用乙腈稀释至1 000 mL，混匀。
5.8 10% 氨水甲醇溶液：取氨水10 mL，用甲醇（5.4）稀释至100 mL，混匀。
5.9 1% 七氟丁酸酐甲酸溶液：取七氟丁酸酐0.5 mL，用0.1% 甲酸溶液（5.6）稀释至50 mL，混匀。
临用现配。
GB/T 44617—2024
1
5.10 2 mol/L 甲酸铵溶液：称取甲酸铵（5.2）12.6 g，用水溶解并稀释至1 000 mL，混匀。
5.11 甲酸铵﹘甲酸溶液：取2 mol/L 甲酸铵溶液（5.10）1 mL、甲酸（5.3）1 mL，用水稀释至
1 000 mL，混匀。
5.12 5% 三氯乙酸溶液：称取三氯乙酸5 g、乙二胺四乙酸二钠0.15 g，加水溶解并稀释至100 mL，
混匀。
5.13 硫酸庆大霉素（Gentamicin sulfate，CAS 号：1405﹘41﹘0）标准品：参考《中华人民共和国药
典》关于硫酸庆大霉素规定要求。参考标准品数值如下：纯度89.8%±5.0%。其中C1 组分含量为
29.5%，C1a 组分含量为19.8%，C2 与C2a 组分含量为50.7%。不同生产厂家的标准品各组分含量可能
不同。也可以采用相应单组分标准品。
5.14 庆大霉素标准储备溶液（以四种庆大霉素组分之和计，100 μg/mL）：称取硫酸庆大霉素标准品
适量（精确至0.01 mg），用水溶解，转移至100 mL 容量瓶，定容，混匀，配制成100 μg/mL 的庆大霉
素标准溶液（其中庆大霉素C1 组分为29.5 μg/mL，庆大霉素C1a 组分为19.8 μg/mL，庆大霉素
C2+C2a 组分为50.7 μg/mL）。－18 ℃ 以下贮存，有效期6 个月。或采用标准物质/标准样品。
5.15 庆大霉素标准中间溶液（10 μg/mL）：准确移取标准储备溶液（5.14）10 mL，用水稀释、定容
至100 mL，混匀。临用现配。
5.16 庆大霉素标准系列溶液：准确移取标准中间溶液（5.15）适量，用1% 七氟丁酸酐甲酸溶液
（5.9）稀释、定容，混匀，配制成质量浓度分别为5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、
200 ng/mL、500 ng/mL（其中庆大霉素C1 组分为1.475 ng/mL、2.95 ng/mL、14.75 ng/mL、
2 9 . 5 n g / m L 、5 9 . 0 n g / m L 、1 4 7 . 5 n g / m L ；庆大霉素C1a 组分为0 . 9 9 n g / m L 、1 . 9 8 n g / m L 、
9.90 ng/mL、19.0 ng/mL、39.6 ng/mL、99 ng/mL；庆大霉素C2+C2a 组分为2.535 ng/mL、
5.07 ng/mL、25.35 ng/mL、50.7 ng/mL、101.4 ng/mL、253.5 ng/mL）的标准工作液，置4℃ 冰箱
中避光保存。现用现配。
5.17 混合型阳离子交换固相萃取小柱：以苯磺酸化的聚苯乙烯﹘二乙烯基苯高聚物为填料，60 mg/
3 mL，或性能相当者。
5.18 微孔滤膜：0.22 μm，有机系。
6 仪器设备
6.1 液相色谱﹘串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
6.2 分析天平：精度分别为0.1 mg 和0.01 mg。
6.3 离心机：转速不低于8 000 r/min。
6.4 超