DB15/T 4106-2025 马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程

　　ICS

　　65.020.01 65.020.01

　　CCS

　　B 16 15

　　内蒙古自治区地方标准

　　DB15/T 4106—2025

　　马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程

　　Code of practice technical for indoor evaluation of potato resistance to black leg disease

　　2025-07-10发布

　　2025-08-10实施

　　内蒙古自治区市场监督管理局 发布

　　DB15/T 4106—2025

　　I

　　前言

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会(SAM/TC 25)归口。

　　本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院、准格尔旗农牧局。

　　本文件主要起草人：孙平平、李正男、张磊、席先梅、雷雪峰、黄秀梅、杨永青、廉勇、付崇毅、霍宏丽、张溪、王金泉、牟英男、吴若晨。

　　DB15/T 4106—2025

　　1

　　马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术 马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术 马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术 马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术 规程

　　1 范围

　　本文件规定了马铃薯黑胫病室内抗性鉴定的术语和定义、培养基制备、接种体制备、接种、病情调查和抗病性评价等内容。

　　本文件适用于马铃薯品种在室内条件下对黑胫病抗性水平的鉴定。

　　2 规范性引用文件

　　本文件没有规范性引用文件。

　　3 术语和定义

　　本文件没有需要界定的术语和定义。

　　4 培养基制备

　　LBA培养基(病原细菌生长固体培养基)：5 g酵母提取物，10 g胰蛋白胨，10 g氯化钠，15 g琼脂粉，1000 mL去离子水，121 ℃灭菌15 min。

　　LB液体培养基(病原细菌生长液体培养基)：不加琼脂粉，其余同LBA的制作方法。

　　5 接种体制备 病原物分离

　　取马铃薯黑胫病感病植株，采用组织分离结合单孢分离法从发病部位分离病原物，柯赫氏法则确定致病菌，形态学、生理生化特性和分子序列对致病菌株进行鉴定，确定为马铃薯黑胫病病原菌Pectobacterium atrosepticum，保存备用。 菌悬液的制备

　　取100μL在-80 ℃保存的分离病原菌涂抹于LBA培养基上，28 ℃培养48 h。挑取菌落于100 mL LB液体培养基中，置于28 ℃、180 r/min培养48 h，用无菌水调节菌悬液浓度至106cfu/mL。 鉴定材料准备

　　选择形态完好、无明显伤病的马铃薯种薯，种植在装有无菌的细沙与腐殖土等量混匀的盆中，出苗后在温室环境下生长。采用随机排列盆栽，待马铃薯植株高约10 cm用于接种。

　　6 接种

　　DB15/T 4106—2025

　　2

　　用无菌牙签在距土壤表面约5 cm处戳伤植株的茎部，吸取10 μL菌悬液，注射于马铃薯植株茎部伤口中，以接种等量LB培养基的处理作为对照，每个品种处理10株，重复3次，将接种植株置于25 ℃～28 ℃和90%以上湿度环境条件下培养。

　　7 病情调查

　　接种7天后，以接种点为中心测定上下各5 cm范围内的发病面积占调查面积的比率进行分级和抗性评价。

　　8 抗病性评价

　　计算抗病等级平均值，以抗病等级平均值评价抗病性：

　　—— 调查范围内无病状发生，抗病等级为高抗(HR);

　　—— 发病面积占调查面积25%以下，抗病等级为抗病(R);

　　—— 发病面积占调查面积25%～50%，抗病等级为中抗(MR);

　　—— 发病面积占调查面积50%～75%，抗病等级为中感(MS);

　　—— 发病面积占调查面积75%～100%，抗病等级为高感(HS)。