GB 5009.31-2025 食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定
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资料介绍
中华人民共和国国家标准
GB5009.31—2025
食品安全国家标准
食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定
2025-03-16发布2025-09-16实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会
国家市场监督管理总局发布
前 言
本标准代替GB5009.31—2016《食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定》。
本标准与GB5009.31—2016相比,主要变化如下:
———标准名称修改为《食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》;
———增加了方法的基质适用范围;
———增加了对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸庚酯的检测方法;
———修改了第一法 气相色谱法的前处理方法、仪器条件和线性范围;
———增加了第二法 高效液相色谱法;
———增加了第三法 液相色谱-串联质谱法。
Ⅰ
GB5009.31—2025
食品安全国家标准
食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定
1 范围
本标准规定了食品中对羟基苯甲酸酯类化合物(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯
甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯和对羟基苯甲酸庚酯)的测定
方法。
本 标准第一法 气相色谱法适用于食品(热凝固蛋制品、酿造酱和调味酱除外)中对羟基苯甲酸酯
类化合物的测定。
本标准第二法 高效液相色谱法、第三法 液相色谱-串联质谱法适用于食品中对羟基苯甲酸酯类
化合物的测定。
第一法 气相色谱法
2 原理
试样用甲醇-水提取,经混合型强阴离子交换固相萃取柱净化和富集,浓缩后用配氢火焰离子化检
测器的气相色谱仪测定,外标法定量。
3 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
3.1 试剂
3.1.1 甲醇(CH3OH)。
3.1.2 甲酸(HCOOH)。
3.1.3 浓氨水(NH3·H2O):25%~28%。
3.2 试剂配制
3.2.1 甲醇-水溶液(2+8):量取100mL甲醇和400mL水,混匀备用。
3.2.2 甲醇-水溶液(3+7):量取150mL甲醇和350mL水,混匀备用。
3.2.3 2%甲酸甲醇溶液:量取2.0mL甲酸,甲醇定容至100mL,混匀备用。
3.3 标准品
3.3.1 对羟基苯甲酸甲酯(C8H8O3,CAS号:99-76-3),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证
书的标准物质。
3.3.2 对羟基苯甲酸乙酯(C9H10O3,CAS号:120-47-8),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质
证书的标准物质。
1
GB5009.31—2025
3.3.3 对羟基苯甲酸丙酯(C10H12O3,CAS号:94-13-3),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质
证书的标准物质。
3.3.4 对羟基苯甲酸丁酯(C11H14O3,CAS号:94-26-8),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质
证书的标准物质。
3.3.5 对羟基苯甲酸异丙酯(C10H12O3,CAS号:4191-73-5),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准
物质证书的标准物质。
3.3.6 对羟基苯甲酸异丁酯(C11H14O3,CAS号:4247-02-3),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准
物质证书的标准物质。
3.3.7 对羟基苯甲酸庚酯(C14H20O3,CAS号:1085-12-7),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物
质证书的标准物质。
3.4 标准溶液配制
3.4.1 单个对羟基苯甲酸酯类化合物标准储备液(1.00mg/mL):分别准确称取对羟基苯甲酸甲酯、对
羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、
对羟基苯甲酸庚酯标准品各0.05g(精确至0.0001g),甲醇溶解并定容至50.0mL,4℃下保存,有效期
为6个月。
3.4.2 对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准中间液(100μg/mL):准确吸取各对羟基苯甲酸酯类化合物
标准储备液1.0mL于10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,4℃下保存,有效期为3个月。
3.4.3 对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准工作液:分别吸取对羟基苯甲酸酯类标准中间液0.20mL、
0.50mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10mL于10mL容量瓶中,用甲醇定容。临用时配制。标准工作溶
液质量浓度为2.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL。
3.5 材料
3.5.1 有机相微孔滤膜:孔径0.22μm。
3.5.2 混合型强阴离子交换固相萃取柱:500mg/6mL,或其他性能相当者。
4 仪器和设备
4.1 气相色谱仪:配氢火焰离子化检测器(FID)。
4.2 电子天平:感量分别为0.001g和0.0001g。
4.3 涡旋混匀器。
4.4 高速离心机:最大转速不低于6000r/min。
4.5 超声波振荡器。
4.6 氮吹仪。
4.7 匀浆机。
4.8 研磨机。
5 分析步骤
5.1 试样制备
液体样品混匀,半固体样品用匀浆机匀浆均匀,固体样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀。制备好的
试样装入洁净的盛样容器内,密封并做好标识,液体试样于4℃下保存,其他试样于-18℃下保存。
2
GB5009.31—2025
5.2 试样处理
5.2.1 提取
5.2.1.1 鲜水果、新鲜蔬菜、焙烤食品馅料及表面用挂浆、醋、酱油、液体复合调味料等
称取样品5g(精确至0.01g)于50mL刻度离心管内,加5mL水,涡旋3min,加入甲醇10mL,涡
旋3min,超声20min,6000r/min离心3min,取全部上清液于另一50mL刻度离心管中,残渣中再加
入甲醇-水溶液(2+8)10 mL 重复提取1 次,合并两次提取液,加水至40 mL,6000r/min 离心
3min,取全部上清液,待净化。
5.2.1.2 果蔬汁、碳酸饮料、风味饮料等
称取5g(精确至0.01g)试样于50mL刻度离心管内(碳酸饮料需在超声波清洗器中超声脱气
10min再称样),加入甲醇-水溶液(3+7)30mL,涡旋3min,超声20min,再加入甲醇-水溶液(3+7)至
40mL,6000r/min离心3min,过滤上清液,取滤液,待净化。
5.2.1.3 果酱等
称取样品5g(精确至0.01g)于50mL刻度离心管内,加入5mL浓氨水,涡旋3min,放置1h,加
入甲醇10mL,涡旋3min,超声20min,6000r/min离心3min。取全部上清液于另一50mL刻度离
心管中。在残渣中再加入甲醇-水溶液(2+8)10 mL,涡旋3 min,超声20 min,6000r/min 离心
3min,合并两次提取液,加水至40mL,6000r/min离心3min,取全部上清液,待净化。
5.2.2 净化
分别用5mL甲醇和5mL水活化固相萃取柱,将待净化的溶液转入已活化固相萃取柱中,依次用
5mL水和5mL甲醇-水溶液(3+7)淋洗,用6mL甲醇洗脱,果酱样品用6mL2%甲酸甲醇溶液洗
脱,收集洗脱液,40℃水浴氮气吹干,1.0mL甲醇复溶,过滤膜,供气相色谱仪测定。
5.3 仪器参考条件
5.3.1 色谱柱:弱极性石英毛细管柱,柱固定液为(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷,30m×0.25mm(内
径),0.25μm(膜厚),或等效柱。
5.3.2 进样口温度:280℃。
5.3.3 载气:氮气,纯度≥99.999%;流速1mL/min,尾吹30mL/min(载气流量大小可根据仪器条件
进行调整)。
5.3.4 进样量:1μL。
5.3.5 进样方式:分流(分流比可根据色谱条件调整)或不分流进样。
5.3.6 升温程序:初始温度70℃,保持2min;以20℃/min升至300℃;保持2min。
5.3.7 检测器:氢火焰离子化检测器(FID),温度300℃。
5.3.8 气体:氢气35mL/min;空气400mL/min(氢气、空气流量大小可根据仪器条件进行调整)。
5.4 标准曲线的制作
将对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准工作溶液按浓度由低到高的顺序注入气相色谱仪中,以标准
溶液的质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。对羟基苯甲酸酯类化合物的气相色谱图
参见附录A 图A.1。
3
GB5009.31—2025
5.5 试样溶液的测定
5.5.1 定性测定
按照5.3所述条件,将对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准工作液和试样溶液分别注入气相色谱仪
中,用保留时间定性。试样溶液中色谱峰的保留时间与混合标准工作液中对羟基苯甲酸酯类化合物的
保留时间相比,其允许偏差应小于±0.5%。
5.5.2 定量测定
按照5.3所述条件,将试样溶液注入气相色谱仪中,得到被测化合物的峰面积,根据标准曲线得到
试样溶液中被测化合物的质量浓度。试样溶液中被测化合物的响应值应在标准曲线线性范围内。若响
应值超出标准曲线线性范围,应稀释后重新分析。
5.6 空白试验
除不加试样外,按5.2步骤与试样同时处理。
6 分析结果的表述
试样中对羟基苯甲酸酯类化合物含量(以对羟基苯甲酸计)按式(1)计算:
Xi = (ρ-ρ0)×V ×1000 m ×1000 ×fi …………………………(1)
式中:
Xi ———试样中对羟基苯甲酸酯类化合物含量(以对羟基苯甲酸计),单位为毫克每千克(mg/
kg);
ρ ———由标准曲线计算出进样液中对羟基苯甲酸酯类化合物的质量浓度,单位为微克每毫升
(μg/mL);
ρ0 ———由标准曲线计算出空白试验样液中对羟基苯甲酸酯类化合物的质量浓度,单位为微克每
毫升(μg/mL);
V ———试液最终定容体积,单位为毫升(mL);
m ———称取试样的质量,单位为克(g);
1000———单位换算系数;
fi ———对羟基苯甲酸酯类化合物转换为对羟基苯甲酸的换算系数。
说明:
0.9078———对羟基苯甲酸甲酯转换为对羟基苯甲酸的换算系数;
0.8312———对羟基苯甲酸乙酯转换为对羟基苯甲酸的换算系数;
0.7665———对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯转换为对羟
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食品安全国家标准
食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定
2025-03-16发布2025-09-16实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会
国家市场监督管理总局发布
前 言
本标准代替GB5009.31—2016《食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定》。
本标准与GB5009.31—2016相比,主要变化如下:
———标准名称修改为《食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》;
———增加了方法的基质适用范围;
———增加了对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸庚酯的检测方法;
———修改了第一法 气相色谱法的前处理方法、仪器条件和线性范围;
———增加了第二法 高效液相色谱法;
———增加了第三法 液相色谱-串联质谱法。
Ⅰ
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食品安全国家标准
食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定
1 范围
本标准规定了食品中对羟基苯甲酸酯类化合物(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯
甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯和对羟基苯甲酸庚酯)的测定
方法。
本 标准第一法 气相色谱法适用于食品(热凝固蛋制品、酿造酱和调味酱除外)中对羟基苯甲酸酯
类化合物的测定。
本标准第二法 高效液相色谱法、第三法 液相色谱-串联质谱法适用于食品中对羟基苯甲酸酯类
化合物的测定。
第一法 气相色谱法
2 原理
试样用甲醇-水提取,经混合型强阴离子交换固相萃取柱净化和富集,浓缩后用配氢火焰离子化检
测器的气相色谱仪测定,外标法定量。
3 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
3.1 试剂
3.1.1 甲醇(CH3OH)。
3.1.2 甲酸(HCOOH)。
3.1.3 浓氨水(NH3·H2O):25%~28%。
3.2 试剂配制
3.2.1 甲醇-水溶液(2+8):量取100mL甲醇和400mL水,混匀备用。
3.2.2 甲醇-水溶液(3+7):量取150mL甲醇和350mL水,混匀备用。
3.2.3 2%甲酸甲醇溶液:量取2.0mL甲酸,甲醇定容至100mL,混匀备用。
3.3 标准品
3.3.1 对羟基苯甲酸甲酯(C8H8O3,CAS号:99-76-3),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证
书的标准物质。
3.3.2 对羟基苯甲酸乙酯(C9H10O3,CAS号:120-47-8),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质
证书的标准物质。
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3.3.3 对羟基苯甲酸丙酯(C10H12O3,CAS号:94-13-3),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质
证书的标准物质。
3.3.4 对羟基苯甲酸丁酯(C11H14O3,CAS号:94-26-8),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质
证书的标准物质。
3.3.5 对羟基苯甲酸异丙酯(C10H12O3,CAS号:4191-73-5),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准
物质证书的标准物质。
3.3.6 对羟基苯甲酸异丁酯(C11H14O3,CAS号:4247-02-3),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准
物质证书的标准物质。
3.3.7 对羟基苯甲酸庚酯(C14H20O3,CAS号:1085-12-7),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物
质证书的标准物质。
3.4 标准溶液配制
3.4.1 单个对羟基苯甲酸酯类化合物标准储备液(1.00mg/mL):分别准确称取对羟基苯甲酸甲酯、对
羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、
对羟基苯甲酸庚酯标准品各0.05g(精确至0.0001g),甲醇溶解并定容至50.0mL,4℃下保存,有效期
为6个月。
3.4.2 对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准中间液(100μg/mL):准确吸取各对羟基苯甲酸酯类化合物
标准储备液1.0mL于10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,4℃下保存,有效期为3个月。
3.4.3 对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准工作液:分别吸取对羟基苯甲酸酯类标准中间液0.20mL、
0.50mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10mL于10mL容量瓶中,用甲醇定容。临用时配制。标准工作溶
液质量浓度为2.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL。
3.5 材料
3.5.1 有机相微孔滤膜:孔径0.22μm。
3.5.2 混合型强阴离子交换固相萃取柱:500mg/6mL,或其他性能相当者。
4 仪器和设备
4.1 气相色谱仪:配氢火焰离子化检测器(FID)。
4.2 电子天平:感量分别为0.001g和0.0001g。
4.3 涡旋混匀器。
4.4 高速离心机:最大转速不低于6000r/min。
4.5 超声波振荡器。
4.6 氮吹仪。
4.7 匀浆机。
4.8 研磨机。
5 分析步骤
5.1 试样制备
液体样品混匀,半固体样品用匀浆机匀浆均匀,固体样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀。制备好的
试样装入洁净的盛样容器内,密封并做好标识,液体试样于4℃下保存,其他试样于-18℃下保存。
2
GB5009.31—2025
5.2 试样处理
5.2.1 提取
5.2.1.1 鲜水果、新鲜蔬菜、焙烤食品馅料及表面用挂浆、醋、酱油、液体复合调味料等
称取样品5g(精确至0.01g)于50mL刻度离心管内,加5mL水,涡旋3min,加入甲醇10mL,涡
旋3min,超声20min,6000r/min离心3min,取全部上清液于另一50mL刻度离心管中,残渣中再加
入甲醇-水溶液(2+8)10 mL 重复提取1 次,合并两次提取液,加水至40 mL,6000r/min 离心
3min,取全部上清液,待净化。
5.2.1.2 果蔬汁、碳酸饮料、风味饮料等
称取5g(精确至0.01g)试样于50mL刻度离心管内(碳酸饮料需在超声波清洗器中超声脱气
10min再称样),加入甲醇-水溶液(3+7)30mL,涡旋3min,超声20min,再加入甲醇-水溶液(3+7)至
40mL,6000r/min离心3min,过滤上清液,取滤液,待净化。
5.2.1.3 果酱等
称取样品5g(精确至0.01g)于50mL刻度离心管内,加入5mL浓氨水,涡旋3min,放置1h,加
入甲醇10mL,涡旋3min,超声20min,6000r/min离心3min。取全部上清液于另一50mL刻度离
心管中。在残渣中再加入甲醇-水溶液(2+8)10 mL,涡旋3 min,超声20 min,6000r/min 离心
3min,合并两次提取液,加水至40mL,6000r/min离心3min,取全部上清液,待净化。
5.2.2 净化
分别用5mL甲醇和5mL水活化固相萃取柱,将待净化的溶液转入已活化固相萃取柱中,依次用
5mL水和5mL甲醇-水溶液(3+7)淋洗,用6mL甲醇洗脱,果酱样品用6mL2%甲酸甲醇溶液洗
脱,收集洗脱液,40℃水浴氮气吹干,1.0mL甲醇复溶,过滤膜,供气相色谱仪测定。
5.3 仪器参考条件
5.3.1 色谱柱:弱极性石英毛细管柱,柱固定液为(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷,30m×0.25mm(内
径),0.25μm(膜厚),或等效柱。
5.3.2 进样口温度:280℃。
5.3.3 载气:氮气,纯度≥99.999%;流速1mL/min,尾吹30mL/min(载气流量大小可根据仪器条件
进行调整)。
5.3.4 进样量:1μL。
5.3.5 进样方式:分流(分流比可根据色谱条件调整)或不分流进样。
5.3.6 升温程序:初始温度70℃,保持2min;以20℃/min升至300℃;保持2min。
5.3.7 检测器:氢火焰离子化检测器(FID),温度300℃。
5.3.8 气体:氢气35mL/min;空气400mL/min(氢气、空气流量大小可根据仪器条件进行调整)。
5.4 标准曲线的制作
将对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准工作溶液按浓度由低到高的顺序注入气相色谱仪中,以标准
溶液的质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。对羟基苯甲酸酯类化合物的气相色谱图
参见附录A 图A.1。
3
GB5009.31—2025
5.5 试样溶液的测定
5.5.1 定性测定
按照5.3所述条件,将对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准工作液和试样溶液分别注入气相色谱仪
中,用保留时间定性。试样溶液中色谱峰的保留时间与混合标准工作液中对羟基苯甲酸酯类化合物的
保留时间相比,其允许偏差应小于±0.5%。
5.5.2 定量测定
按照5.3所述条件,将试样溶液注入气相色谱仪中,得到被测化合物的峰面积,根据标准曲线得到
试样溶液中被测化合物的质量浓度。试样溶液中被测化合物的响应值应在标准曲线线性范围内。若响
应值超出标准曲线线性范围,应稀释后重新分析。
5.6 空白试验
除不加试样外,按5.2步骤与试样同时处理。
6 分析结果的表述
试样中对羟基苯甲酸酯类化合物含量(以对羟基苯甲酸计)按式(1)计算:
Xi = (ρ-ρ0)×V ×1000 m ×1000 ×fi …………………………(1)
式中:
Xi ———试样中对羟基苯甲酸酯类化合物含量(以对羟基苯甲酸计),单位为毫克每千克(mg/
kg);
ρ ———由标准曲线计算出进样液中对羟基苯甲酸酯类化合物的质量浓度,单位为微克每毫升
(μg/mL);
ρ0 ———由标准曲线计算出空白试验样液中对羟基苯甲酸酯类化合物的质量浓度,单位为微克每
毫升(μg/mL);
V ———试液最终定容体积,单位为毫升(mL);
m ———称取试样的质量,单位为克(g);
1000———单位换算系数;
fi ———对羟基苯甲酸酯类化合物转换为对羟基苯甲酸的换算系数。
说明:
0.9078———对羟基苯甲酸甲酯转换为对羟基苯甲酸的换算系数;
0.8312———对羟基苯甲酸乙酯转换为对羟基苯甲酸的换算系数;
0.7665———对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯转换为对羟