DB23/T 3896-2024 玉米穗腐病抗源鉴定及评价技术规程
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- 标准类型：食品地方标准
- 标准语言：中文版
- 文件类型：PDF文档
- 更新时间：2025-06-07
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资料介绍
以下是黑龙江省地方标准《玉米穗腐病抗源鉴定及评价技术规程》（DB23/T 3896—2024）的详细内容总结：
一、范围
适用于玉米种质资源对镰孢穗腐病（病原菌：禾谷镰孢、拟轮枝镰孢、亚粘团镰孢、层出镰孢）的田间抗性鉴定与评价。
二、规范性引用文件
包括种子标准（GB 4404.1）、玉米抗病虫鉴定规范（NY/T 1248.8）、机械化栽培规程（DB23/T 2154）等。
三、术语定义
- 玉米穗腐病抗源鉴定：利用混合镰孢菌人工接种，筛选抗病种质资源。
- 关键病原菌：禾谷镰孢、拟轮枝镰孢、亚粘团镰孢、层出镰孢。
四、接种体制备
1. 病原菌分离与鉴定
- 分离：病粒经酒精→次氯酸钠→无菌水处理，接种PDA培养基（25–27℃黑暗培养3天）。
- 致病力验证：根部接种法结合柯赫氏法则确认。
- 鉴定：形态学+分子生物学（按NY/T 1248.8执行）。
2. 孢子悬浮液配制
| 病原菌 | 培养基 | 培养条件 | 孢子浓度 |
|---|---|---|---|
| 禾谷镰孢 | PDA + 无菌盐水 | 28–30℃震荡培养（150–180 rpm） | 2×10⁶孢子/mL |
| 拟轮枝镰孢 | 高粱粒培养基 | 26℃避光培养5天 | 2×10⁶孢子/mL |
| 亚粘团镰孢 | 高粱粒培养基 | 26℃避光培养5天 | 2×10⁶孢子/mL |
| 层出镰孢 | 高粱粒培养基 | 26℃避光培养5天 | 2×10⁶孢子/mL |
- 混合孢子液：四种菌按体积比 4:2:1:0.5 混合，4℃保存≤48小时。
五、抗病性鉴定圃设置
- 圃地要求：
- 具备自然发病环境，可排灌。
- 分区种植：按晚熟、中熟、早熟分3区，每区设抗/感对照（附录A.1）。
- 种植设计：
- 单行区，3次重复，随机排列。
- 行长5m、行距0.65m，密度75,000株/公顷。
- 播种与管理：
- 种子不包衣，人工点播（每穴2粒，留1苗）。
- 禁用杀菌剂，其他管理同大田（按DB23/T 2154）。
六、接种操作
- 时期：雌穗吐丝后3–5天或花丝长5–10 cm。
- 方法：
- 每株选第1果穗，用定量注射器在花丝通道侧边注入 2 mL混合孢子液。
- 接种后：保持田间湿度。
七、病情调查
- 时间：完熟期。
- 方法：
- 采收接种果穗，去苞叶。
- 按发病面积占比分级（附录A.2）：
病情分级 发病面积占比 1 0–1% 3 2–10% 5 11–25% 7 26–50% 9 51–100%
八、抗病性评价
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计算公式：
/text{平均病情级别 (ERSA)} = /frac{/sum_{i=1}^{n} /text{ERS}_i}{n}（ERSᵢ：单穗病情级别；n：调查穗数；结果保留1位小数）
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评价标准（附录A.3）：
平均病情级别 抗性等级 ≤1.5 高抗 (HR) 1.6–3.5 抗 (R) 3.6–5.5 中抗 (MR) 5.6–7.5 感 (S) 7.6–9.0 高感 (HS) -
有效性判定：感病对照鉴定为“感(S)”时，结果有效。
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复鉴要求：初鉴为“抗(R)”或“高抗(HR)”的资源需次年重复鉴定，以最高病情级别为准。
九、鉴定档案
记录内容：
- 病原菌来源、鉴定过程
- 接种体配制参数
- 鉴定材料名称、接种/调查时间
- 各病情级别株数、抗性评价结果（附录A.4）
附录A（资料性）
- A.1 熟期对照表（例：晚熟区抗病对照X178，感病对照B73）。
- A.2 病情分级标准（1–9级）。
- A.3 抗性评价标准（HR至HS）。
- A.4 鉴定结果记录表示例（含品种编号、各级病株数、平均级别、抗性评价）。
核心目标：通过标准化流程筛选抗镰孢穗腐病的玉米种质，为抗病育种提供可靠资源。