DB11/T 1809-2025 实验动物 微生物检测

北京市地方标准 DB11/T 1809-2025《实验动物微生物检测》主要内容总结

​​1. 适用范围​​

适用于实验小型猪、猪、牛、羊、狨猴、长爪沙鼠、雪貂、猫、鸡、鸭、鹅、鸽、鱼（斑马鱼、剑尾鱼）、树鼩的微生物检测，涵盖普通级、无特定病原体级（SPF）和无菌级实验动物。

​​2. 等级分类​​

• ​​普通级实验动物​​：排除人兽共患病、烈性传染病及干扰实验的病原。
• ​​无特定病原体级（SPF）​​：进一步排除潜在感染或条件致病病原。
• ​​无菌级​​：无可检出的任何生命体。

​​3. 检测要求​​

​​（1）外观检查​​
评估动物的精神状态、行为、被毛、分泌物等。

​​（2）微生物检测项目​​

• ​​实验动物分类检测表​​（表1-表9）：
  • ​​普通级​​：必检项目包括伪狂犬病毒、非洲猪瘟（猪）、口蹄疫病毒（牛/羊）、沙门氏菌等；允许免疫部分项目（如犬瘟热病毒）。
  • ​​SPF级​​：必检项目更严格，如猪需检测猪流感、轮状病毒等；禁止免疫。
  • ​​无菌级​​：排除所有可检生命体。

​​新增检测项目举例​​：

• 实验猪/小型猪：非洲猪瘟病毒、猪流感病毒。
• 狨猴：猴逆转D型病毒。
• 长爪沙鼠：肺孢子菌属、产酸克雷伯杆菌。
• 树鼩：疱疹病毒、腺病毒、变形杆菌等。

​​4. 检测程序​​

​​（1）通用流程​​（图1）：
外观检查 → 麻醉（必要时） → 采血/拭子/组织样本 → 实验室检测（抗原、抗体、核酸）。
​​（2）实验鱼特殊流程​​（图2）：
麻醉后取鳃、肝、肾等组织，结合水样检测。
​​（3）树鼩流程​​（新增）：包括沙门菌、疱疹病毒等检测。

​​5. 检测方法​​

​​（1）引用标准​​：

• 病毒检测：GB/T 18638（乙型脑炎）、GB/T 18648（非洲猪瘟）。
• 细菌检测：GB/T 14926.1（沙门氏菌）、NY/T 563（多杀巴氏杆菌）。
• 分子生物学：PCR、荧光PCR（如附录A-G）。

​​（2）附录方法举例​​：

• ​​附录A​​：猫泛白细胞减少症病毒PCR（引物设计、反应条件、301bp产物判定）。
• ​​附录K​​：实验鱼分枝杆菌鉴定（抗酸染色结合生化试验区分海分枝杆菌等）。
• ​​附录R​​：螺杆菌检测（780bp产物判定）。

​​6. 检测规则​​

• ​​频率​​：每3个月至少检测1次。
• ​​抽样​​：
  • ​​数量​​：群体<100抽5只，100-500抽10只，>500抽15只；实验鱼按5%比例（最多30尾）。
  • ​​月龄​​：猪≥6月，牛≥6月，禽类≥1月，鱼≥3月。
• ​​送检要求​​：样品与送检单同步，注明品系、等级、检测项目。

​​7. 结果判定​​

• ​​抗体​​：群体免疫合格率≥70%为合格；非免疫项目需阴性。
• ​​抗原/核酸​​：无阳性结果判合格。
• ​​结论​​：全部合格则符合等级；任一项不合格则降级。

​​8. 结论与报告​​

• ​​报告内容​​：检测结果需明确是否符合相应等级，不合格项目需列出。
• ​​附录应用​​：检测方法需严格遵循附录中的操作步骤（如反应体系、温度条件）。

​​9. 主要更新（2025版 vs 2020版）​​

• ​​新增检测项目​​：非洲猪瘟、猪流感、猴逆转D型病毒等。
• ​​方法更新​​：猪圆环病毒2型检测改用ELISA，奇异变形杆菌检测引用SN/T标准。
• ​​结构调整​​：增加树鼩检测章节，优化检测流程图。

​​核心意义​​

该标准通过规范实验动物的微生物控制，确保实验数据的科学性和生物安全性，适用于科研、生产及检定等领域，保障实验动物质量与福利。