HJ 77.4-2025 土壤和沉积物 二噁英类的测定 同位素稀释/高分辨气相色谱-高分辨质谱法

　　ICS13.080.01Z10

　　中华人民共和国国家生态环境标准

　　HJ77.4—2025代替 HJ77.4—2008

　　土壤和沉积物 二噁英类的测定

　　同位素稀释/高分辨气相色谱-高分辨

　　质谱法

　　Soil and Sediment-Determination of polychlorinated dibenzo-p-dioxins and

　　polychlorinated dibenzofurans-Isotope dilution / high resolution gas

　　chromatography-high resolution mass spectrometry

　　本电子版为正式标准文件，由生态环境部环境标准研究所审校排版。

　　2025-12-22发布 2026-07-01实施

　　生态环境部发 布 HJ77.4—2025

　　目次

　　前言 Ⅱ

　　1适用范围 1

　　2 规范性引用文件 1

　　3术语和定义 1

　　4方法原理 3

　　5 干扰和消除 3

　　6 试剂和材料 3

　　7仪器和设备 5

　　8样品 6

　　9分析步骤 9

　　10结果计算与表示 11

　　11准确度 15

　　12 质量保证和质量控制 16

　　13报告 18

　　14注意事项 18

　　附录A(规范性附录) 方法的检出限和测定下限 19

　　附录B(资料性附录) 二噁英类名称及异构体数目 20

　　附录C(规范性附录) 2,3,7,8-氯代二噁英类的毒性当量因子 21

　　附录D(资料性附录) 样品提取、净化、分离及仪器分析流程图 22

　　附录E(资料性附录) 二噁英类校准溶液系列示例 23

　　附录F(资料性附录) 样品自动净化系统淋洗过程和净化分离程序示例 24

　　附录G(资料性附录) 二噁英类监测离子理论离子丰度比 25

　　附录H(资料性附录) 二噁英类内标物质使用示例 26

　　附录I(资料性附录) 方法的准确度 27

　　附录J(资料性附录) 报告格式示例 36 HJ77.4—2025

　　前言

　　为贯彻《中华人民共和国环境保护法》《中华人民共和国土壤污染防治法》，防治生态环境污染，改善生态环境质量，规范土壤和沉积物中二噁英类的测定方法，制定本标准。

　　本标准规定了测定土壤和沉积物中二噁英类的同位素稀释/高分辨气相色谱-高分辨质谱法。

　　本标准的附录A 和附录C为规范性附录，附录B、附录D～附录J为资料性附录。

　　本标准是对《土壤和沉积物 二噁英类的测定 同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法》(HJ77.4-2008)的修订。

　　《土壤和沉积物 二噁英类的测定 同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法》(HJ77.4-2008)首次发布于2008 年，起草单位为国家环境分析测试中心。本次为第一次修订。主要修订内容如下：

　　——增加了干扰和消除、方法检出限、测定下限、样品保存时间、准确度等内容;

　　——删除了部分术语和定义、符号和缩略语、样品检出限、废物处理等内容;

　　——修改了规范性引用文件、试剂和材料、仪器和设备、样品、结果计算与表示、报告等内容;

　　——完善了分析步骤、质量保证和质量控制等内容。

　　自本标准实施之日起，《土壤和沉积物 二噁英类的测定 同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法》(HJ 77.4-2008)废止。

　　本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。

　　本标准主要起草单位：浙江省生态环境监测中心、国家环境分析测试中心。

　　本标准验证单位：湖北省生态环境监测中心站、重庆市生态环境监测中心、江苏省泰州环境监测中心、浙江省台州生态环境监测中心、浙江省宁波生态环境监测中心、浙江大学。

　　本标准生态环境部2025年12月22日批准。

　　本标准自2026年7月1日起实施。

　　本标准由生态环境部解释。

　　土壤和沉积物 二噁英类的测定

　　同位素稀释/高分辨气相色谱-高分辨质谱法

　　警告：实验中使用的溶剂和标准样品溶液等具有毒性，试剂配制及样品前处理过程应在通风橱中操作;按要求佩戴防护器具，避免吸入呼吸道或接触皮肤和衣物。

　　1适用范围

　　本标准规定了测定土壤和沉积物中二噁英类的同位素稀释/高分辨气相色谱-高分辨质谱法。

　　本标准适用于土壤和沉积物中二噁英类的测定。

　　样品取样量为10 g，定容体积为30 μL时，2,3,7,8-氯代二噁英类的方法检出限为0.08 ng/kg～0.7 ng/kg，测定下限为0.32 ng/kg～2.8 ng/kg。详见附录A。

　　2 规范性引用文件

　　本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是注明日期的引用标准，仅注日期的版本适用于本标准。凡是未注日期的引用标准，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。其他文件被新文件废止、修改、修订的，新文件适用于本标准。

　　GB17378.3 海洋监测规范 第3 部分：样品采集、贮存与运输

　　GB17378.5 海洋监测规范 第5 部分：沉积物分析

　　HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范

　　HJ/T166 土壤环境监测技术规范

　　HJ 442.4 近岸海域环境监测技术规范 第四部分 近岸海域沉积物监测

　　HJ 494 水质采样技术指导

　　HJ 613 土壤 干物质和水分的测定重量法

　　HJ 916 环境二噁英类监测技术规范

　　3术语和定义

　　下列术语和定义适用于本标准。

　　3.1

　　多氯代二苯并-对-二噁英 polychlorinated dibenzo-p-dioxins(PCDDs)

　　一氯代二苯并-对-二噁英～八氯代二苯并-对-二噁英的统称，有75 种同类物，参见附录B。3.2

　　四氯代二苯并-对-二噁英 tetrachlorodibenzo-p-dioxins(T4CDDs)

　　四氯代二苯并-对-二噁英的统称，有22 种异构体。

　　3.3

　　五氯代二苯并-对-二噁英 pentachlorodibenzo-p-dioxins(P5CDDs)

　　五氯代二苯并-对-二噁英的统称，有14 种异构体。 3.4

　　六氯代二苯并-对-二噁英 hexachlorodibenzo-p-dioxins(H6CDDs)

　　六氯代二苯并-对-二噁英的统称，有10 种异构体。

　　3.5

　　七氯代二苯并-对-二噁英 heptachlorodibenzo-p-dioxins(H7CDDs)

　　七氯代二苯并-对-二噁英的统称，有2 种异构体。

　　3.6

　　八氯代二苯并-对-二噁英 octachlorodibenzo-p-dioxin(O8CDD)

　　八氯代二苯并-对-二噁英，无异构体。

　　3.7

　　多氯代二苯并呋喃 polychlorinated dibenzofurans(PCDFs)

　　一氯代二苯并呋喃～八氯代二苯并呋喃的统称，有135 种同类物，参见附录B。

　　3.8

　　四氯代二苯并呋喃 tetrachlorodibenzofurans(T4CDFs)

　　四氯代二苯并呋喃的统称，有38 种异构体。

　　3.9

　　五氯代二苯并呋喃 pentachlorodibenzofurans(P5CDFs)

　　五氯代二苯并呋喃的统称，有28 种异构体。

　　3.10

　　六氯代二苯并呋喃 hexachlorodibenzofurans(H6CDFs)

　　六氯代二苯并呋喃的统称，有16 种异构体。

　　3.11

　　七氯代二苯并呋喃 heptachlorodibenzofurans(H7CDFs)

　　七氯代二苯并呋喃的统称，有4 种异构体。

　　3.12

　　八氯代二苯并呋喃 octachlorodibenzofuran(O8CDF)

　　八氯代二苯并呋喃，无异构体。

　　3.13

　　二噁英类 polychlorinated dibenzo-p-dioxins and polychlorinated dibenzofurans(PCDD/Fs)多氯代二苯并-对-二噁英和多氯代二苯并呋喃的统称，有210 种同类物。

　　3.14

　　2,3,7,8-氯代二噁英类 2,3,7,8-chlorine substituted PCDDs and PCDFs

　　第2、3、7、8位氢原子被氯原子取代的所有二噁英类化合物的统称，包括7种多氯代二苯并-对-二噁英和10 种多氯代二苯并呋喃，共 17 种化合物，见附录A。

　　3.15

　　毒性当量因子 toxicity equivalency factor(TEF)

　　各二噁英类化合物与2,3,7,8-四氯代二苯并-对-二噁英(2,3,7,8-T4CDD)对芳香烃受体(AhR)的亲和性能之比。2,3,7,8-氯代二噁英类毒性当量因子见附录C。

　　3.16

　　毒性当量质量分数 toxicity equivalency quantity(TEQ)

　　各二噁英类化合物质量分数折算为相当于2,3,7,8-T4CDD 毒性的等价质量分数，毒性当量质量分数为质量分数与该化合物毒性当量因子(TEF)的乘积。样品毒性当量质量分数为17 种2,3,7,8-氯代二噁英类毒性当量质量分数之和，非2,3,7,8-氯代二噁英类毒性远低于 17种2,3,7,8-氯代二噁英类，其毒性 当量质量分数忽略不计。

　　4方法原理

　　土壤或沉积物样品制备后添加提取内标，经提取、净化、分离、浓缩等操作后，加入进样内标，经高分辨气相色谱-高分辨质谱仪检测，根据保留时间和监测离子丰度比定性，同位素稀释法定量。

　　土壤和沉积物样品中二噁英类的提取、净化、分离及仪器分析流程参见附录D。

　　5干扰和消除

　　5.1 样品提取时，多氯联苯、多氯二苯醚、多溴二苯醚、部分有机氯农药、硫、腐殖质等常见干扰物会随目标化合物一并提取。采用本方法中推荐的净化分离技术可减少或降低其干扰水平。

　　5.2 样品中存在目标化合物的同分异构体干扰测定时，可通过改变色谱分离条件或更换不同性能色谱柱提高分离度。

　　6试剂和材料

　　除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，有机溶剂(壬烷除外)浓缩 1.0×104倍后不得检出二噁英类，实验用水为新制备的不含目标化合物的纯水。

　　6.1甲醇(CH3OH)：农残级。

　　6.2 丙酮(CH3COCH3)：农残级。

　　6.3甲苯(C7H8)：农残级。

　　6.4 二氯甲烷(CH2Cl2)：农残级。

　　6.5 正己烷(C6H14)：农残级。

　　6.6 壬烷(C9H20)：优级纯。

　　6.7 盐酸(HCl)：ρ=1.18 g/mL，w∈[36.0%，38.0%]，优级纯。

　　6.8 硫酸(H2SO4)：w∈[95%，98%]，优级纯。

　　6.9 氢氧化钠(NaOH)。

　　6.10 硝酸银(AgNO3)：优级纯。

　　6.11 氯化钠(NaCl)：优级纯。

　　400℃灼烧4 h，置于干燥器中冷却至室温，转移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。

　　6.12 无水硫酸钠(Na2SO4)。

　　400℃灼烧4 h，置于干燥器中冷却至室温，转移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。

　　6.13 二氯甲烷-正己烷溶液I。

　　二氯甲烷(6.4)与正己烷(6.5)以体积比1:49 混合。

　　6.14 二氯甲烷-正己烷溶液Ⅱ。

　　二氯甲烷(6.4)与正己烷(6.5)以体积比1:3 混合。

　　6.15 二氯甲烷-正己烷溶液Ⅲ。

　　二氯甲烷(6.4)与正己烷(6.5)以体积比1:1 混合。

　　6.16盐酸溶液。

　　盐酸(6.7)与水以体积比17:83 混合。

　　6.17 氢氧化钠溶液：ρ(NaOH)=40 g/L。

　　称取4 g 氢氧化钠(6.9)溶于少量水中，稀释至100 mL。 6.18 氯化钠溶液：ρ(NaCl)=50 g/L。

　　称取5 g 氯化钠(6.11)溶于少量水中，稀释至100 mL。

　　6.19 硝酸银溶液：ρ(AgNO3)=400 g/L。

　　称取40 g 硝酸银(6.10)溶于少量水中，稀释至100 mL。

　　6.20 二噁英类标准溶液。

　　用壬烷(6.6)或甲苯(6.3)配制的 2,3,7,8-氯代二噁英类标准溶液。可购买市售有证标准溶液，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.21 二噁英类校准溶液。

　　用壬烷(6.6)或甲苯(6.3)配制的二噁英类标准物质与相应内标物质的混合溶液，至少应包括 5种不同的质量浓度梯度，参见附录E。可购买市售有证标准溶液，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.22 提取内标。

　　选择同位素标记的二噁英类作为提取内标，参见附录E。可购买市售有证标准溶液，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.23 进样内标。

　　选择同位素标记的二噁英类作为进样内标，参见附录E。可购买市售有证标准溶液，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.24 质量校准物质全氟煤油(PFK)：纯度≥98%。

　　市售有证标准溶液，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.25 质量校准物质全氟三丁胺(PFTBA)：ρ=1.88 g/mL。

　　市售有证标准溶液，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.26 凝胶渗透色谱校正标准贮备液。

　　市售有证标准溶液，包含玉米油 (ρ=300 mg/mL)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 (ρ=15 mg/mL)、五氯酚 (ρ=1.4 mg/mL)、芘 (ρ=0.1 mg/mL)、单质硫 (ρ=0.5mg/mL)，按照标准溶液证书要求保存。

　　6.27铜粉(珠)。

　　于干燥器中保存，使用前用盐酸溶液(6.16)浸泡至铜粉(珠)无气泡产生，然后用水、丙酮(6.2)、甲苯(6.3)分别清洗，临用前处理。

　　6.28 石墨化炭黑：150μm～178μm(100 目～80 目)。

　　6.29 硅藻土：20 μm～100μm(600 目～150 目)。

　　6.30 硅胶：60μm～230μm(230 目～65 目)。

　　用二氯甲烷(6.4)洗净，待二氯甲烷全部挥发后，摊放在蒸发皿或烧杯中，厚度小于10 mm，130℃烘烤18 h，放在干燥器中冷却至室温，转移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。

　　6.31 氢氧化钠硅胶：w(NaOH)=1.3%。

　　取硅胶(6.30)67 g，加入氢氧化钠溶液(6.17)33 g，充分搅拌，使之呈流体粉末状。制备完成后装入玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。亦可购买市售商品，于干燥器中密封保存。

　　6.32 硫酸硅胶：w(H2SO4)=44%。

　　取硅胶(6.30)56 g，加入硫酸(6.8)44 g，充分搅拌，使之呈流体粉末状。制备完成后装入玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。亦可购买市售商品，于干燥器中密封保存。

　　6.33 硝酸银硅胶：w(AgNO3)=10%。

　　取硅胶(6.30)90g，加入硝酸银溶液(6.19)25mL，使用旋转蒸发装置50℃减压充分脱水。制备完成后装入棕色玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。配制过程中使用棕色遮光板或铝箔遮挡光线，避免硝酸银见光分解。亦可购买市售商品，于干燥器中避光密封保存。

　　6.34 氧化铝。

　　层析填充柱用氧化铝(碱性，活性度 I)，也可使用活性氧化铝。必要时可按照如下步骤活化：将 氧化铝在烧杯中铺成厚度小于10 mm的薄层，130℃烘烤18 h，或在培养皿中铺成厚度小于5 mm的薄层，500℃灼烧8 h，活化后的氧化铝在干燥器内冷却至室温，转移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存，保存时间不超过5 d。亦可购买市售商品，于干燥器中密封保存。

　　6.35 活性炭或活性炭硅胶。

　　在内衬聚四氟乙烯螺帽的玻璃瓶中将9 g 石墨化炭黑(6.28)与41 g 硅藻土(6.29)混合均匀，130℃烘烤6 h，置于干燥器中冷却至室温，转移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。使用前，用甲苯(6.3)索氏提取48h以上，确认甲苯不变色，若甲苯变色，重复索氏提取。索氏提取后，180℃烘烤4h，再用旋转蒸发装置50℃减压干燥1 h，于干燥器中密封保存备用。亦可购买活性炭硅胶市售商品，避光保存。

　　6.36 样品自动净化柱。

　　包括多层硅胶柱、硅酸镁柱或氧化铝柱、活性炭硅胶柱，满足2,3,7,8-氯代二噁英类净化分离要求。市售，避光保存。

　　6.37 石英砂：250 μm～380μm(60 目～40 目)。

　　400℃灼烧4 h，置于干燥器中冷却至室温，转移至玻璃瓶中密封保存。

　　6.38 石英棉/玻璃棉。

　　使用前，用二氯甲烷(6.4)回流提取6 h，或200℃烘烤2 h，于密闭玻璃容器中保存。

　　6.39 石英纤维滤筒。

　　400℃灼烧6 h，置于干燥器中保存。

　　6.40 氮气：纯度≥99.999%。

　　6.41 氦气：纯度≥99.999%。

　　7仪器和设备

　　7.1采样设备

　　采样设备应符合GB17378.3、HJ/T166、HJ 442.4、HJ 494 及HJ916的相关要求，选用不锈钢(木质)、采土(泥)器等。

　　7.2样品容器

　　样品容器应符合GB17378.3、HJ/T166、HJ 442.4、HJ 494 及HJ916的相关要求，并使用棕色玻璃、不锈钢等材质，容器可密封。

　　7.3分析仪器

　　7.3.1高分辨气相色谱仪

　　7.3.1.1 进样口：具有分流/不分流进样功能，使用温度不低于280℃。也可使用柱上进样或程序升温大体积进样方式。

　　7.3.1.2 柱温箱：具有程序升温功能，可在50℃~350℃范围内可调节。

　　7.3.1.3 色谱柱：60 m(柱长)×0.25 mm(内径)×0.25μm(膜厚)，固定相为5%苯基-95%甲基聚硅氧烷或其他等效的低流失毛细管色谱柱。

　　注：为保证对2,3,7,8-氯代二噁英类具有良好的分离度，存在干扰时可选择不同性能的毛细管色谱柱进行校核。

　　7.3.2高分辨质谱仪

　　7.3.2.1 高分辨质谱仪为双聚焦磁质谱仪，具有气质联机接口，使用温度不低于280℃。

　　7.3.2.2 具有电子轰击离子源(EI)，电子能量可在25 eV～70 eV 范围内调节。

　　7.3.2.3 具有选择离子监测功能，质量校正使用锁定质量模式。

　　7.3.2.4 动态分辨率大于1.0×104(10%峰谷定义，下同)并至少可稳定 24h。当使用的内标包含13C12-O8CDF时，动态分辨率应大于1.2×104。

　　7.3.2.5 高分辨状态下(动态分辨率大于1.0×104)，1 s 内能够重复监测12 个监测离子。

　　7.3.2.6 数据处理系统能够实时采集、记录及存储质谱数据。

　　7.4前处理设备

　　7.4.1 冷冻干燥仪。

　　7.4.2 提取装置：索氏提取器、加压流体萃取仪或其他性能相当的提取装置。

　　7.4.3 样品自动净化系统：可设定程序自动对样品自动净化柱(6.36)进行不同类别溶剂预淋洗、样品淋洗及淋洗液收集。

　　7.4.4 凝胶渗透色谱仪：配有紫外检测器(波长254 nm)及凝胶柱，装填约70 g多孔聚苯乙烯二乙烯基苯生物活性微球体填料，5 mL～10 mL 样品定量环。可根据不同厂家的设计对进样体积进行校正。

　　7.4.5 浓缩装置：旋转蒸发装置、氮吹仪以及性能相当的其他浓缩装置。

　　7.4.6 填充柱：内径8 mm～15 mm，长100 mm～300 mm的玻璃填充柱。

　　7.4.7 玻璃管：内径约8 mm，长约160 mm的可翻转玻璃管，配套聚四氟乙烯接头。

　　7.4.8 一般实验室常用仪器和设备。

　　8样品

　　8.1 样品采集和保存

　　土壤样品按照HJ/T 166和HJ916的相关要求采集，沉积物样品按照GB17378.3、HJ/T91、HJ 442.4、HJ494和HJ916的相关要求采集。

　　样品采集后，置于样品容器(7.2)中，4℃以下避光、密封保存，30d内完成样品的制备(8.2)。如不能及时分析，样品可在制备后避光、密封，常温下保存1 a。样品提取液可于-10℃以下避光、密封保存1a。

　　8.2 样品的制备

　　除去样品中的异物(枝棒、叶片、石子等)，参照GB17378.5、HJ/T166 和HJ 442.4的相关要求，对土壤或沉积物样品采用自然风干或冷冻干燥仪(7.4.1)脱水处理。脱水后样品经研磨、过筛，分取后密封保存于棕色玻璃瓶中。样品风干及过筛时应避免阳光直射，同时防止样品间的交叉污染。

　　8.3 水分的测定

　　按照HJ613 测定土壤样品干物质含量，按照GB17378.5 测定沉积物样品含水率。

　　8.4试样的制备

　　8.4.1 添加提取内标

　　称取约10g(精确至0.01g)样品，添加提取内标(6.22)。提取内标推荐添加量为四氯代～七氯代二噁英类0.4 ng～2.0 ng，八氯代二噁英类0.8 ng～4.0 ng。

　　注：根据样品类型、干扰程度、污染物含量及萃取方法调整取样量，对于高浓度样品，可适当减少取样量或适当增加提取内标添加量并按一定比例分割提取液(8.4.2)。

　　8.4.2提取

　　8.4.2.1盐酸处理

　　如样品含碳状物，需用盐酸溶液(6.16)处理。

　　将样品(8.4.1)转移至石英纤维滤筒(6.39)中，用盐酸溶液(6.16)处理。盐酸的用量为每 1 g样品至少加10mL盐酸溶液(6.16)。搅拌样品，使其与盐酸溶液(6.16)充分接触并观察发泡情况，必要时再添加盐酸溶液(6.16)，直到不再发泡为止。过滤盐酸溶液处理液，并用水充分冲洗石英纤维滤筒，再用少量甲醇(6.1)或丙酮(6.2)冲洗去除石英纤维滤筒及样品中的水分，将冲洗后的石英纤维滤筒放入烧杯中，转移至洁净的干燥器中充分干燥。将冲洗液与盐酸溶液处理液合并后，按样品溶液与二氯甲烷(6.4)体积比10:1的比例液液萃取，重复3 次，萃取液使用无水硫酸钠(6.12)脱水。将石英纤维滤筒及样品充分干燥后，采用索氏提取或加压流体萃取方式提取。将萃取液和提取液合并，浓缩至1 mL～2 mL。

　　8.4.2.2索氏提取

　　在样品(8.4.1 或8.4.2.1)中按1:1的比例加入无水硫酸钠(6.12)或硅藻土(6.29)，转移至索氏提取器(7.4.2)上，用甲苯(6.3)为溶剂提取16 h以上，回流速度控制在4次/h～6次/h。将提取液浓缩至1 mL～2 mL。

　　8.4.2.3 加压流体萃取

　　将样品(8.4.1或8.4.2.1)转移至加压流体萃取仪(7.4.2)的萃取池中，按 1:1的比例加入无水硫酸钠(6.12)或硅藻土(6.29)。参考条件：压力10.3 MPa，温度120℃,萃取溶剂为甲苯(6.3)，静态萃取时间5 min，循环3次，收集提取液。将提取液浓缩至1 mL～2 mL。

　　8.4.3 净化及分离

　　8.4.3.1除硫

　　如样品中含硫，提取液应首先除硫。

　　在提取液(8.4.2)中添加50 mL 正己烷(6.5)，再加入适量处理后的铜粉(珠)(6.27)，充分振荡，直至铜粉(珠)不变色，静置30 min，过滤，收集滤液，浓缩至1 mL～2 mL。

　　8.4.3.2 凝胶渗透色谱(GPC)净化

　　样品存在大分子干扰时，可选择凝胶渗透色谱仪(7.4.4)对提取液(8.4.2)或经除硫后的提取液(8.4.3.1)净化处理。

　　使用二氯甲烷(6.4)淋洗凝胶渗透色谱仪，弃去淋洗液。注入凝胶渗透色谱校正标准贮备液(6.26)于样品定量环中，使用二氯甲烷(6.4)自动洗脱校正标准贮备液，记录紫外检测器响应信号。正常色 谱流出峰顺序依次为玉米油、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、五氯酚、芘和硫。设置二噁英类收集时间段，以85%以上玉米油信号峰流出且85%以上邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯能被收集的时间点为样品开始收集时间，硫最高信号峰时间点为样品结束收集时间。

　　将提取液(8.4.2)或经除硫后的提取液(8.4.3.1)转移至定量环中，使用二氯甲烷(6.4)洗脱，收集二噁英类时间段内的淋洗液。将淋洗液浓缩至10 mL，加入3 mL 正己烷(6.5)，浓缩至1 mL～2 mL。

　　注：凝胶渗透色谱净化过程中，每20 个样品或每批次(少于20 个样品/批)应进行凝胶渗透色谱校正标准贮备液(6.26)确认，如五氯酚的回收率高于85%，则认为净化有效，反之，则前一处理批次样品应重新提取净化。

　　8.4.3.3 硫酸处理-硅胶柱净化

　　如提取液颜色较深，可使用硫酸处理-硅胶柱净化。

　　将提取液(8.4.2)或经除硫(8.4.3.1)、GPC 净化(8.4.3.2)后的提取液用50 mL～150 mL正己烷(6.5)洗入分液漏斗中，再加入10 mL～20 mL 硫酸(6.8)，轻微振荡，静置分层，弃去硫酸层，重复操作至硫酸层变浅或无色。加入适量氯化钠溶液(6.18)洗涤有机相，重复数次洗至中性，有机相经无水硫酸钠(6.12)脱水后，浓缩至1 mL～2 mL。

　　在内径8 mm～12 mm填充柱(7.4.6)底部垫一小团石英棉/玻璃棉(6.38)，干法装填3 g 硅胶(6.30)和约10mm 厚的无水硫酸钠(6.12)。填充后硅胶柱用50mL正己烷(6.5)预淋洗并排出气泡，保持液面与无水硫酸钠齐平，弃去预淋洗液。将硫酸处理后的浓缩液转移至硅胶柱上，用150 mL 正己烷(6.5)淋洗样品，调节淋洗速度约为2.5 mL/min(大约1 滴/s)，收集淋洗液。将淋洗液浓缩至1 mL～2 mL。

　　8.4.3.4 多层硅胶柱净化

　　在内径12 mm～15 mm填充柱(7.4.6)底部垫一小团石英棉/玻璃棉(6.38)，自下而上依次干法装填3 g 硅胶(6.30)、5 g 氢氧化钠硅胶(6.31)、2 g 硅胶(6.30)、10 g 硫酸硅胶(6.32)、2g 硅胶(6.30)、

　　3 g 硝酸银硅胶(6.33)和5 g 无水硫酸钠(6.12)。填充后多层硅胶柱用100 mL 正己烷(6.5)预淋洗并排出气泡，保持液面与无水硫酸钠齐平，弃去预淋洗液。将提取液(8.4.2)或经除硫(8.4.3.1)、GPC净化(8.4.3.2)后的提取液转移至多层硅胶柱上，用100mL正己烷(6.5)淋洗样品，调节淋洗速度约为2.5 mL/min(大约1 滴/s)，收集淋洗液。将淋洗液浓缩至1 mL～2 mL。

　　注：若多层硅胶柱中硫酸硅胶装填部分的颜色出现穿透现象，则应重新净化。

　　8.4.3.5 氧化铝柱净化分离

　　在内径8mm～12mm 填充柱(7.4.6)底部垫一小团石英棉/玻璃棉(6.38)，自下而上依次干法装填约10mm 厚的无水硫酸钠(6.12)、10g 氧化铝(6.34)、约10 mm 厚的无水硫酸钠(6.12)，填充后氧化铝柱用50mL正己烷(6.5)预淋洗并排出气泡，保持液面与无水硫酸钠齐平，弃去预淋洗液。将经过硫酸处理-硅胶柱净化(8.4.3.3)或多层硅胶柱净化(8.4.3.4)的样品浓缩液转移到氧化铝柱上。先用100mL 二氯甲烷-正己烷溶液I(6.13)淋洗，弃去淋洗液。再用150mL的二氯甲烷-正己烷溶液Ⅲ (6.15)淋洗，调节淋洗速度约为2.5 mL/min(大约1 滴/s)，收集淋洗液。将淋洗液浓缩至1 mL以下，待制备后分析。

　　8.4.3.6 活性炭硅胶柱净化分离

　　在内径8 mm玻璃管(7.4.7)一端填入石英棉/玻璃棉(6.38)，依次装填约10 mm 厚的无水硫酸钠(6.12)、1.0g 活性炭硅胶(6.35)、约10mm 厚的无水硫酸钠(6.12)、石英棉/玻璃棉(6.38)，使活性炭硅胶(6.35)处于玻璃管(7.4.7)中间位置。填充后用25 mL正己烷(6.5)预淋洗。将经过硫酸处理-硅胶柱净化(8.4.3.3)或多层硅胶柱净化(8.4.3.4)的样品浓缩液转移到活性炭硅胶柱上。活性炭硅胶柱的淋洗方式可选取以下任意1 种： a)活性炭硅胶柱反向淋洗。依次使用25 mL 正己烷(6.5)、40 mL 二氯甲烷-正己烷溶液Ⅱ(6.14)淋洗活性炭硅胶柱，待淋洗液全部流出后，弃去淋洗液。然后翻转活性炭硅胶柱，使用60 mL甲苯(6.3)淋洗，调节淋洗流速约为2.5 mL/min(大约1 滴/s)，收集淋洗液。将淋洗液浓缩至1 mL以下，待制备后分析。

　　b)活性炭硅胶柱正向淋洗。依次使用25 mL 正己烷(6.5)、200mL 二氯甲烷-正己烷溶液Ⅱ(6.14)淋洗活性炭硅胶柱，待淋洗液全部流出后，弃去淋洗液。使用200 mL甲苯(6.3)淋洗，调节淋洗流速约为2.5 mL/min(大约1 滴/s)，收集淋洗液。将淋洗液浓缩至1 mL以下，待制备后分析。

　　8.4.3.7自动净化

　　将样品自动净化柱(6.36)按顺序连接在样品自动净化系统(7.4.3)上，配制各淋洗溶液并连接好管路，设定淋洗程序。

　　将提取液(8.4.2)或经除硫(8.4.3.1)、GPC 净化(8.4.3.2)后的提取液注入样品定量环中，对样品进行净化、分离，收集含有二噁英类组分的淋洗液。将淋洗液浓缩至1 mL以下，待制备后分析。样品自动净化系统淋洗过程和净化分离程序参见附录F。

　　8.4.3.8 其他净化分离方法

　　可以使用其他方法或装置进行样品的净化分离处理。使用前用有证标准物质或二噁英类标准溶液(6.20)进行净化和分离效果试验，并确认满足本方法质量保证和质量控制的要求。

　　8.4.4 上机样品的制备

　　将浓缩后的淋洗液(8.4.3.5或8.4.3.6或8.4.3.7)用浓缩装置(7.4.5)进一步浓缩至近干。添加进样内标(6.23)，用壬烷(6.6)或甲苯(6.3)将样品制备至10 μL～50 μL，待测。进样内标推荐添加量为0.2 ng～2.0 ng。

　　8.5空白试样的制备

　　用石英砂(6.37)代替样品，按与试样的制备(8.4)相同步骤制备空白试样。

　　9分析步骤

　　9.1 仪器参考条件

　　9.1.1 高分辨气相色谱参考条件

　　进样口温度：280℃;进样方式：不分流;进样量：1 μL;载气：氦气(6.41);流量：1.2mL/min。

　　色谱柱升温程序：130℃保持1 min，以15℃/min 升温至210℃,然后以3℃/min 升温至310℃,再以5℃/min 升温至320℃,保持5 min。

　　9.1.2 高分辨质谱参考条件

　　离子源温度：280℃;电子能量：35 eV;传输线温度：280℃;监测方式：选择离子监测模式(SIM)。二噁英类及质量校准物质的监测离子质量数见表1。 表1 二噁英类及质量校准物质的监测离子质量数

　　序号 化合物简称 M+ (M+2)+ (M+4)+ 1 T4CDDs 319.8965 321.893 6 / 2 P5CDDs / 355.854 6 357.851 7a 3 H6CDDs / 389.815 7 391.812 7a 4 H7CDDs / 423.776 7 425.773 7 5 O8CDD / 457.737 7 459.7348 6 T4CDFs 303.901 6 305.898 7 / 7 P5CDFs / 339.859 7 341.8568 8 H6CDFs / 373.820 7 375.8178 9 H7CDFs / 407.7818 409.7788 10 O8CDF / 441.7428 443.7398 11 13C12-T4CDDs 331.9368 333.933 9 / 12 13C12-P5CDDs / 367.894 9 369.891 9 13 13C12-H6CDDs / 401.855 9 403.853 0 14 13C12-H7CDDs / 435.816 9 437.814 0 15 13C12-O8CDD / 469.778 0 471.775 0 16 13C12-T4CDFs 315.941 9 317.938 9 / 17 13C12-P5CDFs / 351.900 0 353.897 0 18 13C12-H6CDFs 383.863 9 385.861 0 / 19 13C12-H7CDFs 417.825 3 419.822 0 / 20 13C12-O8CDF 451.786 0 453.783 0 /

　　21

　　PFK 292.982 5(四氯代二噁英类校准用) 354.979 2(五氯代二噁英类校准用) 392.976 0(六氯代二噁英类校准用) 430.972 9(七氯代二噁英类校准用) 442.972 8(八氯代二噁英类校准用)

　　22

　　PFTBA 313.983 9(四氯代二噁英类校准用) 351.980 7(五氯代二噁英类校准用) 375.980 7(六氯代二噁英类校准用) 413.977 5(七氯代二噁英类校准用) 425.977 5(八氯代二噁英类校准用) 注：“/”表示无此项内容。 a 可能存在PCBs 干扰。

　　9.2校准

　　9.2.1 仪器性能检查

　　仪器使用前，应调谐高分辨质谱仪，导入质量校准物质PFK(6.24)或PFTBA(6.25)得到稳定的响应后，手动或自动优化质谱仪参数，使质量校准物质的监测离子质量数动态分辨率大于1.0×104，且峰形呈正态分布。当使用的内标包含13C12-O8CDF时，动态分辨率应大于1.2×104。

　　9.2.2 标准曲线的建立

　　二噁英类校准溶液(6.21)浓度系列至少应有5 个非零质量浓度梯度，参见附录E，可根据样品实际情况适当调整标准曲线浓度范围。按照仪器参考条件(9.1)，由低浓度到高浓度依次进样，记录各目 标化合物的保留时间和监测离子质谱峰的峰面积。校准溶液中目标化合物的2 个监测离子丰度比的变化范围应在理论离子丰度比(参见附录G)±15%以内。校准溶液中，最低质量浓度的目标化合物色谱峰信噪比应大于10。

　　以目标化合物浓度为横坐标，目标化合物与提取内标监测离子峰面积的比值和提取内标浓度的乘积为纵坐标，建立标准曲线。

　　9.3试样测定

　　将待测样品(8.4.4)按照与标准曲线的建立(9.2.2)相同条件测定。

　　9.4空白试验

　　按照与试样测定(9.3)相同条件测定空白试样(8.5)。

　　10结果计算与表示

　　10.1定性分析

　　10.1.1二噁英类

　　在色谱图上，信噪比大于3的色谱峰视为有效峰。二噁英类的2 个监测离子在指定保留时间窗口内同时存在，且其丰度比的变化范围应在理论离子丰度比(参见附录G)±15%以内。

　　10.1.2 2,3,7,8-氯代二噁英类

　　除满足10.1.1 要求外，色谱峰的保留时间应与校准溶液相差±15 s以内，同时其提取内标的相对保留时间应与校准溶液相差±0.5%以内。2,3,7,8-氯代二噁英类标准物质总离子色谱图见图1。

　　17

　　100

　　16

　　3

　　7

　　13

　　12

　　10

　　15

　　11

　　14

　　40

　　1

　　20

　　0

　　20.00 22.00 24.00 26.00 28.00 30.00 32.00 34.00 36.00 38.00 40.00 42.00 44.00

　　时间(min)

　　1——2,3,7,8-T4CDF/13C12-2,3,7,8-T4CDF/13C12-1,2,3,4-T4CDD;2——2,3,7,8-T4CDD/13C12-2,3,7,8-T4CDD;

　　3——1,2,3,7,8-P5CDF/13C12-1,2,3,7,8-P5CDF;4——2,3,4,7,8-P5CDF/13C12-2,3,4,7,8-P5CDF;

　　5——1,2,3,7,8-P5CDD/13C12-1,2,3,7,8-P5CDD;6——1,2,3,4,7,8-H6CDF/13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDF;

　　7——1,2,3,6,7,8-H6CDF/13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDF;8——2,3,4,6,7,8-H6CDF/13C12-2,3,4,6,7,8-H6CDF;

　　HJ77.4—2025

　　9——1,2,3,4,7,8-H6CDD/13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDD;10——1,2,3,6,7,8-H6CDD/13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDD;

　　11——1,2,3,7,8,9-H6CDD/13C12-1,2,3,7,8,9-H6CDD;12——1,2,3,7,8,9-H6CDF/13C12-1,2,3,7,8,9-H6CDF;

　　13——1,2,3,4,6,7,8-H7CDF/13C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDF;14——1,2,3,4,6,7,8-H7CDD/13C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDD;

　　15——1,2,3,4,7,8,9-H7CDF/13C12-1,2,3,4,7,8,9-H7CDF;16——O8CDD/13C12-O8CDD;17——O8CDF。

　　图1 2,3,7,8-氯代二噁英类标准物质总离子色谱图[色谱柱：固定相为5%苯基-95%甲基聚硅氧烷，

　　60 m(柱长)×0.25 mm(内径)×0.25 μm(膜厚)]

　　10.2定量分析

　　根据监测离子峰面积，采用同位素稀释法定量。样品中进样内标的峰面积应不低于同一浓度水平下二噁英类校准溶液中进样内标峰面积的70%，否则应查找原因，重新测定。

　　10.3结果计算

　　10.3.1 平均相对响应因子

　　目标化合物相对于提取内标的相对响应因子，按照公式(1)计算。

　　RRFes,i

　　式中：

　　RRFes,i——第i 个浓度校准溶液中目标化合物相对于提取内标的相对响应因子;

　　mes,i——第i 个浓度校准溶液中提取内标的绝对量，pg;

　　ms,i——第i 个浓度校准溶液中目标化合物的绝对量，pg;

　　As,i——第i 个浓度校准溶液中目标化合物的监测离子峰面积之和;

　　Aes,i——第i 个浓度校准溶液中提取内标的监测离子峰面积之和。

　　提取内标相对于进样内标的相对响应因子，按照公式(2)计算。

　　RRFrs,i

　　mes,iArs,i

　　式中：

　　RRFrs,i ——第i 个浓度校准溶液中提取内标相对于进样内标的相对响应因子;

　　mrs,i——第i 个浓度校准溶液中进样内标的绝对量，pg;

　　m ——第i个浓度校准溶液中提取内标的绝对量，pg;

　　es,i

　　Aes,i——第i 个浓度校准溶液中提取内标的监测离子峰面积之和;

　　Ars,i——第i 个浓度校准溶液中进样内标的监测离子峰面积之和。

　　目标化合物相对于提取内标的平均相对响应因子，按照公式(3)计算。

　　es ……………………………………………(3)

　　式中：

　　RRFes——目标化合物相对于提取内标的平均相对响应因子; RRFes,i ——第i 个浓度校准溶液中目标化合物相对于提取内标的相对响应因子;

　　n——校准溶液系列的数量。

　　目标化合物相对于提取内标的相对响应因子的相对标准偏差，按照公式(4)计算。

　　RSD

　　式中：

　　RSD——目标化合物相对于提取内标的相对响应因子的相对标准偏差，%;

　　RRFes,i ——第i 个浓度校准溶液中目标化合物相对于提取内标的相对响应因子;

　　RRFes——目标化合物相对于提取内标的平均相对响应因子;

　　n——校准溶液系列的数量。

　　提取内标相对于进样内标的平均相对响应因子，按照公式(5)计算。

　　rs

　　式中：

　　RRFrs ——提取内标相对于进样内标的平均相对响应因子;

　　RRFrs,i ——第i 个浓度校准溶液中提取内标相对于进样内标的相对响应因子;

　　n——校准溶液系列的数量。

　　10.3.2 提取内标回收率

　　试样中提取内标回收率，按照公式(6)计算。

　　R)

　　式中：

　　R ——试样中提取内标回收率，%;

　　Ae's——试样中提取内标的监测离子峰面积之和;

　　Ar's——试样中进样内标的监测离子峰面积之和;

　　'

　　mrs——试样中进样内标的添加量，pg;

　　'

　　mes——试样中提取内标的添加量，pg;

　　RRF rs——提取内标相对于进样内标的平均相对响应因子。

　　10.3.3目标化合物的量

　　试样中目标化合物的量按照公式(7)计算。对于四氯代～八氯代的多氯代二苯并-对-二噁英和多氯代二苯并呋喃的量，采用具有相同氯原子取代数的2,3,7,8-氯代二噁英类RRFes计算，参见附录H。

　　mj

　　式中：

　　mj——试样中目标化合物j的量，pg;

　　Aj——试样中目标化合物j的监测离子峰面积之和;

　　Ae's——试样中提取内标的监测离子峰面积之和;

　　'

　　mes——试样中提取内标的添加量，pg;

　　RRFes——目标化合物相对于提取内标的平均相对响应因子。

　　10.3.4 土壤样品中目标化合物的质量分数

　　土壤样品中目标化合物的质量分数，按照公式(8)计算。

　　w1,jD………………………………………

　　式中：

　　w1,j——土壤样品中目标化合物j的质量分数，ng/kg;

　　mj——试样中目标化合物j的量，pg;

　　m1——样品的称取量，g;

　　wdm——土壤样品的干物质含量，%;

　　D——稀释倍数。

　　10.3.5 沉积物样品中目标化合物的质量分数

　　沉积物样品中目标化合物的质量分数，按照公式(9)计算。

　　w2,jD…………………………………

　　式中：

　　w2,j——沉积物样品中目标化合物j的质量分数，ng/kg;

　　mj——试样中目标化合物j的量，pg;

　　m2——样品的称取量，g;

　　wH2O——沉积物样品的含水率，%;

　　D——稀释倍数。

　　10.4结果表示

　　10.4.1 质量分数

　　2,3,7,8-氯代二噁英类质量分数大于方法检出限，应直接记录;若低于方法检出限，则记为“ND”。四氯代～八氯代二噁英类质量分数根据各氯代异构体质量分数累加计算。

　　10.4.2 毒性当量质量分数

　　2,3,7,8-氯代二噁英类毒性当量质量分数为质量分数与对应的毒性当量因子(见附录C)的乘积。若质量分数低于方法检出限，则以0 计算毒性当量质量分数，有特别指明，可按方法检出限的1/2 计算毒性当量质量分数。 样品二噁英类毒性当量质量分数为 17 种 2,3,7,8-氯代二噁英类毒性当量质量分数之和。按照公式(10)计算。

　　w 或2,j×TE

　　式中：

　　w——样品中二噁英类毒性当量质量分数，ng TEQ/kg;

　　w1或2,j——土壤或沉积物样品中目标化合物j的质量分数，ng/kg;

　　TEFj——目标化合物j的毒性当量因子，使用时应注明毒性当量因子的版本。

　　10.4.3 数值修约与表达

　　测定结果最多保留3 位有效数字，小数点后的位数与方法检出限一致。

　　11准确度

　　11.1精密度

　　6家实验室分别对加标质量分数为四氯代二噁英类0.250 ng/kg、5.00 ng/kg、50.0 ng/kg，五氯代~七氯代二噁英类1.25ng/kg、25.0ng/kg、250ng/kg，八氯代二噁英类2.50ng/kg、50.0ng/kg、500ng/kg ，对应加标毒性当量质量分数为2.50 ngTEQ/kg、50.0 ngTEQ/kg、501 ngTEQ/kg的空白石英砂样品进行6次重复测定。2,3,7,8-氯代二噁英类的实验室内相对标准偏差分别为5.2%～37%、1.6%～19%和1.6%～13%;实验室间相对标准偏差分别为7.9%～21%、6.4%～15%和4.2%～11%;重复性限分别为0.09 ng/kg~1.1 ng/kg、0.59 ng/kg～11 ng/kg和5.0 ng/kg～90ng/kg;再现性限分别为0.16ng/kg～1.5ng/kg、1.0 ng/kg～15 ng/kg和7.4 ng/kg～147 ng/kg。二噁英类毒性当量质量分数的实验室内相对标准偏差分别为3.9%～8.4%、1.1%～5.4%和0.92%～4.0%;实验室间相对标准偏差分别为11%、12% 和8.5%;重复性限分别为0.4 ngTEQ/kg、4.3 ngTEQ/kg和40 ngTEQ/kg;再现性限分别为0.8 ngTEQ/kg、17 ngTEQ/kg和122 ngTEQ/kg。

　　6 家实验室分别对加标质量分数为四氯代二噁英类0.250ng/kg、5.00ng/kg、50.0ng/kg，五氯代～七氯代二噁英类1.25 ng/kg、25.0 ng/kg、250 ng/kg，八氯代二噁英类2.50 ng/kg、50.0 ng/kg、500 ng/kg，对应加标毒性当量质量分数为2.50ngTEQ/kg、50.0ngTEQ/kg、501ngTEQ/kg的土壤样品进行6次重复测定。2,3,7,8-氯代二噁英类的实验室内相对标准偏差分别为 5.1%～34%、1.8%～15%和1.9%～12%;实验室间相对标准偏差分别为 6.9%～23%、4.5%～15%和 3.4%～11%;重复性限分别为 0.08 ng/kg ~1.2 ng/kg、0.74 ng/kg～9.1 ng/kg和4.8ng/kg～72 ng/kg;再现性限分别为0.15ng/kg～1.4ng/kg、0.90 ng/kg～14 ng/kg和6.4 ng/kg～132 ng/kg。二噁英类毒性当量质量分数的实验室内相对标准偏差分别为3.4%～11%、2.3%～3.9%和0.77%～2.7%;实验室间相对标准偏差分别为 11%、11%和8.6%;重复性限分别为0.5ngTEQ/kg、4.9ngTEQ/kg和27ngTEQ/kg;再现性限分别为0.9ngTEQ/kg、16ngTEQ/kg和120 ngTEQ/kg。

　　6 家实验室分别对加标质量分数为四氯代二噁英类0.250ng/kg、5.00ng/kg、50.0ng/kg，五氯代～七氯代二噁英类1.25 ng/kg、25.0 ng/kg、250 ng/kg，八氯代二噁英类2.50 ng/kg、50.0 ng/kg、500ng/kg，对应加标毒性当量质量分数为2.50ngTEQ/kg、50.0ngTEQ/kg、501ngTEQ/kg的沉积物样品进行6次重复测定。2,3,7,8-氯代二噁英类的实验室内相对标准偏差分别为4.2%～34%、2.2%～17%和1.4%～11%;实验室间相对标准偏差分别为 8.7%～22%、5.2%～13%和 4.3%～12%;重复性限分别为 0.10 ng/kg ~1.2 ng/kg、0.66 ng/kg～11 ng/kg和5.8 ng/kg～83ng/kg;再现性限分别为0.18ng/kg～1.5ng/kg、0.98 ng/kg～13 ng/kg和8.0 ng/kg～141 ng/kg。二噁英类毒性当量质量分数的实验室内相对标准偏差分别为4.1%～9.7%、2.4%～4.1%和0.73%～3.2%;实验室间相对标准偏差分别为11%、9.0%和8.2%;重复性限分别为0.5ngTEQ/kg、5.1ngTEQ/kg和35ngTEQ/kg;再现性限分别为0.9ngTEQ/kg、14ng TEQ/kg 和117 ng TEQ/kg。

　　方法精密度数据参见附录I中表I.1。

　　11.2正确度

　　6 家实验室分别对加标质量分数为四氯代二噁英类0.250ng/kg、5.00ng/kg、50.0ng/kg，五氯代～七氯代二噁英类1.25 ng/kg、25.0 ng/kg、250 ng/kg，八氯代二噁英类2.50 ng/kg、50.0 ng/kg、500 ng/kg，对应加标毒性当量质量分数为2.50ngTEQ/kg、50.0ngTEQ/kg、501ngTEQ/kg的空白石英砂样品进行

　　6 次重复测定。2,3,7,8-氯代二噁英类的加标回收率范围分别为70.0%～129%、81.4%～128%和82.7%~115%;加标回收率最终值分别为98.8%±24.4%～108%±21.2%、97.2%±20.0%～106%±31.6%和96.4%±16.8%～99.9%±17.8%。二噁英类毒性当量质量分数的加标回收率范围分别为86.2%～115%、86.1%~116%和85.4%～107%;加标回收率最终值分别为102%±21.6%、102%±23.8%和98.3%±16.6%。

　　6 家实验室分别对加标质量分数为四氯代二噁英类0.250ng/kg、5.00ng/kg、50.0ng/kg，五氯代～七氯代二噁英类1.25 ng/kg、25.0 ng/kg、250 ng/kg，八氯代二噁英类2.50 ng/kg、50.0 ng/kg、500 ng/kg，对应加标毒性当量质量分数为2.50ngTEQ/kg、50.0ngTEQ/kg、501ngTEQ/kg的土壤样品进行6 次重复测定。2,3,7,8-氯代二噁英类的加标回收率范围分别为 74.8%～137%、83.2%～122%和 80.6%～110%;加标回收率最终值分别为99.0%±32.2%～114%±27.2%、96.6%±8.6%～103%±25.8%和96.0%±16.2%~100%±16.4%。二噁英类毒性当量质量分数的加标回收率范围分别为85.5%～121%、88.9%～115%和85.5%～107%;加标回收率最终值分别为105%±24.8%、102%±21.8%和97.7%±16.8%。

　　6 家实验室分别对加标质量分数为四氯代二噁英类0.250ng/kg、5.00ng/kg、50.0ng/kg，五氯代～七氯代二噁英类1.25 ng/kg、25.0 ng/kg、250 ng/kg，八氯代二噁英类2.50 ng/kg、50.0 ng/kg、500 ng/kg，对应加标毒性当量质量分数为2.50ngTEQ/kg、50.0ngTEQ/kg、501ngTEQ/kg的沉积物样品进行6次重复测定。2,3,7,8-氯代二噁英类加标回收率范围分别为 75.3%～137%、83.1%～124%和 80.5%～113%;加标回收率最终值分别为98.7%±31.0%～110%±22.2%、97.7%±12.8%～104%±27.2%和95.8%±24.0%~100%±17.6%。二噁英类毒性当量质量分数的加标回收率范围分别为84.6%～118%、89.3%～112%和87.6%～108%;加标回收率最终值分别为102%±23.0%、101%±18.2%和97.9%±16.0%。

　　6家实验室分别对有证标准物质进行6次重复测定2,3,7,8-氯代二噁英类的相对误差范围为-18%~49%;相对误差最终值为-9.8%±19.6%～34%±21.4%。二噁英类毒性当量质量分数的相对误差范围为-5.4%～3.9%;相对误差最终值为-1.2%±6.6%。

　　方法正确度数据参见附录I中表I.2 和表I.3。

　　12 质量保证和质量控制

　　12.1空白试验

　　每20 个样品或每批次样品(少于20 个)至少分析1 个实验室空白。实验室空白中O8CDD 和O8CDF测定结果应低于测定下限，其余15 种2,3,7,8-氯代二噁英类测定结果应低于方法检出限。

　　12.2 仪器性能检查

　　样品分析按每24h 或每批样品至少1 次检查高分辨质谱仪的仪器性能，验证分辨率及质量校正，质 量校准物质的监测离子质量数动态分辨率需大于1.0×104，否则该批次样品需重新测定。

　　12.3 仪器检出限

　　选择计算相对响应因子的最低质量浓度的二噁英类校准溶液进行 7 次重复测定，定量校准溶液中2,3,7,8-氯代二噁英类，计算测定结果的标准偏差，仪器检出限按照公式(11)计算，修约为 1 位有效数字。

　　IDL =t(n-1,0.99)×S …………………………………………(11)

　　式中：

　　IDL——仪器检出限，pg;

　　n——校准溶液的平行测定次数;

　　t——自由度为n-1，置信度为99%时的t 分布值(单侧)，t(6,0.99) =3.143;

　　S——n次平行测定的标准偏差，pg。

　　仪器检出限规定为四氯代、五氯代二噁英类0.1pg，六氯代、七氯代二噁英类0.2pg，八氯代二噁英类0.5 pg。当测量条件改变时，应确认仪器检出限。当测得的仪器检出限计算结果高于规定限值时，应查找原因，解决后重新测定，使其满足要求。

　　12.4 标准曲线

　　二噁英类校准溶液系列各质量浓度点目标化合物相对于提取内标的相对响应因子相对标准偏差不大于 20%，否则应重新绘制标准曲线。仪器连续开机时，同一台仪器的同一条标准曲线在仪器正常运行下的使用期限不得超过180 d。

　　12.5连续校准

　　选择中间质量浓度的二噁英类校准溶液，每24 h 或每批样品至少1次测定，目标化合物及内标的测定结果峰面积应不低于初始标准曲线在该点峰面积的70%，质量浓度变化应在±35%以内，否则应查找原因，解决后重新连续校准，或者重新绘制标准曲线计算相对响应因子。

　　12.6 提取内标回收率

　　提取内标回收率应满足表2 要求，否则应查找原因，直至回收率满足要求，才能进行样品定量分析。

　　表2 提取内标回收率范围

　　序号 提取内标 回收率范围(%) 1 13C12-2,3,7,8-T4CDD 35～150 2 13C12-1,2,3,7,8-P5CDD 25～165 3 13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDD 35～145 4 13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDD 35～135 5 13C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDD 25～145 6 13C12- O8CDD 20～155 7 13C12-2,3,7,8-T4CDF 25～155 8 13C12-1,2,3,7,8-P5CDF 25～160 9 13C12-2,3,4,7,8-P5CDF 20～155 10 13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDF 35～135 11 13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDF 35～135 12 13C12-2,3,4,6,7,8-H6CDF 30～140 续表

　　序号 提取内标 回收率范围(%) 13 13C12-1,2,3,7,8,9-H6CDF 30～135 14 13C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDF 25～145 15 13C12-1,2,3,4,7,8,9-H7CDF 25～145

　　12.7平行样

　　每20个样品或每批次样品(少于20个)至少分析 1个平行样，2,3,7,8-氯代二噁英类的测定结果大于方法测定下限时，平行样之间单个化合物的相对偏差绝对值不大于40%。

　　12.8正确度测定

　　每20 个样品或每批次样品(少于20 个)至少分析1 个土壤或沉积物有证标准物质，有证标准物质的测定结果应在其证书提供的参考值范围内。

　　13报告

　　报告对象为17 种2,3,7,8-氯代二噁英类，内容应包括目标化合物、质量分数、毒性当量因子以及毒性当量质量分数等，同时可给出四氯代～七氯代的多氯代二苯并-对-二噁英和多氯代二苯并呋喃(T4CDDs～H7CDDs 和T4CDFs～H7CDFs)质量分数。报告宜采用表格形式，参见附录J。

　　14注意事项

　　14.1 实验过程中使用的玻璃器皿可能污染样品，使用前应清洗干净，并用甲醇(6.1)或丙酮(6.2)、二氯甲烷(6.4)或甲苯(6.3)和正己烷(6.5)依次冲洗。所有接口处严禁使用油脂。

　　14.2 接触过高浓度样品的玻璃器皿不能用于低浓度样品分析，沾染二噁英类的实验器皿，如无法去除污染，应按危险废物处置。

　　14.3 分析人员应了解二噁英类分析操作以及相关风险，做好防护措施，并接受相关的专业培训。

　　附录A

　　(规范性附录)

　　方法的检出限和测定下限

　　样品取样量为10g(精确至0.01g)，定容体积为30μL时，2,3,7,8-氯代二噁英类的方法检出限、测定下限见表A.1。

　　表A.1 方法检出限和测定下限

　　序号 化合物名称 化合物简称 CAS No. 检出限(ng/kg) 测定下限(ng/kg) 1 2,3,7,8-四氯代二苯并-对-二噁英 2,3,7,8-T4CDD 1746-01-6 0.08 0.32 2 1,2,3,7,8-五氯代二苯并-对-二噁英 1,2,3,7,8-P5CDD 40321-76-4 0.5 2.0 3 1,2,3,4,7,8-六氯代二苯并-对-二噁英 1,2,3,4,7,8-H6CDD 39227-28-6 0.4 1.6 4 1,2,3,6,7,8-六氯代二苯并-对-二噁英 1,2,3,6,7,8-H6CDD 57653-85-7 0.5 2.0 5 1,2,3,7,8,9-六氯代二苯并-对-二噁英 1,2,3,7,8,9-H6CDD 19408-74-3 0.4 1.6 6 1,2,3,4,6,7,8-七氯代二苯并-对-二噁英 1,2,3,4,6,7,8-H7CDD 35822-46-9 0.5 2.0 7 八氯代二苯并-对-二噁英 O8CDD 3268-87-9 0.7 2.8 8 2,3,7,8-四氯代二苯并呋喃 2,3,7,8-T4CDF 51207-31-9 0.09 0.36 9 1,2,3,7,8-五氯代二苯并呋喃 1,2,3,7,8-P5CDF 57117-41-6 0.5 2.0 10 2,3,4,7,8-五氯代二苯并呋喃 2,3,4,7,8-P5CDF 57117-31-4 0.4 1.6 11 1,2,3,4,7,8-六氯代二苯并呋喃 1,2,3,4,7,8-H6CDF 70648-26-9 0.4 1.6 12 1,2,3,6,7,8-六氯代二苯并呋喃 1,2,3,6,7,8-H6CDF 57117-44-9 0.5 2.0 13 2,3,4,6,7,8-六氯代二苯并呋喃 2,3,4,6,7,8-H6CDF 60851-34-5 0.5 2.0 14 1,2,3,7,8,9-六氯代二苯并呋喃 1,2,3,7,8,9-H6CDF 72918-21-9 0.4 1.6 15 1,2,3,4,6,7,8-七氯代二苯并呋喃 1,2,3,4,6,7,8-H7CDF 67562-39-4 0.5 2.0 16 1,2,3,4,7,8,9-七氯代二苯并呋喃 1,2,3,4,7,8,9-H7CDF 55673-89-7 0.4 1.6 17 八氯代二苯并呋喃 O8CDF 39001-02-0 0.6 2.4

　　附录B

　　(资料性附录)

　　二噁英类名称及异构体数目

　　一氯代～八氯代二噁英类名称及相应异构体数目见表B.1。

　　表B.1 二噁英类名称及异构体数目

　　序号 化合物名称 化合物简称 分子式 异构体数目 1 一氯代二苯并-对-二噁英 M1CDDs C12H7ClO2 2 2 二氯代二苯并-对-二噁英 D2CDDs C12H6Cl2O2 10 3 三氯代二苯并-对-二噁英 T3CDDs C12H5Cl3O2 14 4 四氯代二苯并-对-二噁英 T4CDDs C12H4Cl4O2 22 5 五氯代二苯并-对-二噁英 P5CDDs C12H3Cl5O2 14 6 六氯代二苯并-对-二噁英 H6CDDs C12H2Cl6O2 10 7 七氯代二苯并-对-二噁英 H7CDDs C12HCl7O2 2 8 八氯代二苯并-对-二噁英 O8CDD C12Cl8O2 1 9 多氯代二苯并-对-二噁英 PCDDs / 75 10 一氯代二苯并呋喃 M1CDFs C12H7ClO 4 11 二氯代二苯并呋喃 D2CDFs C12H6Cl2O 16 12 三氯代二苯并呋喃 T3CDFs C12H5Cl3O 28 13 四氯代二苯并呋喃 T4CDFs C12H4Cl4O 38 14 五氯代二苯并呋喃 P5CDFs C12H3Cl5O 28 15 六氯代二苯并呋喃 H6CDFs C12H2Cl6O 16 16 七氯代二苯并呋喃 H7CDFs C12HCl7O 4 17 八氯代二苯并呋喃 O8CDF C12Cl8O 1 18 多氯代二苯并呋喃 PCDFs / 135 注：“/”表示无此项内容。

　　附录C

　　(规范性附录)

　　2,3,7,8-氯代二噁英类的毒性当量因子

　　2,3,7,8-氯代二噁英类的毒性当量因子见表C.1。

　　表C.1 2,3,7,8-氯代二噁英类的毒性当量因子

　　序号 化合物简称 WHO-TEF(2022) I-TEF 1 2,3,7,8-T4CDD 1 1 2 1,2,3,7,8-P5CDD 0.4 0.5 3 1,2,3,4,7,8-H6CDD 0.09 0.1 4 1,2,3,6,7,8-H6CDD 0.07 0.1 5 1,2,3,7,8,9-H6CDD 0.05 0.1 6 1,2,3,4,6,7,8-H7CDD 0.05 0.01 7 O8CDD 0.001 0.001 8 2,3,7,8-T4CDF 0.07 0.1 9 1,2,3,7,8-P5CDF 0.01 0.05 10 2,3,4,7,8-P5CDF 0.1 0.5 11 1,2,3,4,7,8-H6CDF 0.3 0.1 12 1,2,3,6,7,8-H6CDF 0.09 0.1 13 2,3,4,6,7,8-H6CDF 0.1 0.1 14 1,2,3,7,8,9-H6CDF 0.2 0.1 15 1,2,3,4,6,7,8-H7CDF 0.02 0.01 16 1,2,3,4,7,8,9-H7CDF 0.1 0.01 17 O8CDF 0.002 0.001 注1：“WHO-TEF”为世界卫生组织制订的毒性当量因子，如有修订，以最新版本为准;

　　注2：“I-TEF”为北大西洋公约组织制订的国际毒性当量因子。

　　附录D

　　(资料性附录)

　　样品提取、净化、分离及仪器分析流程图

　　土壤和沉积物样品中二噁英类的提取、净化、分离及仪器分析流程见图D.1。

　　样品(土壤、沉积物)

　　提取内标

　　样品提取

　　(盐酸处理(可选)、索氏提取或加

　　压流体萃取)

　　分割部分提取液(可选)

　　除硫(可选)

　　GPC净化(可选)

　　多层硅胶柱净化或硫酸处理-硅胶柱净化样品自动净化

　　氧化铝柱净化分离或活性炭硅胶柱净化分离

　　进样内标

　　上机样品制备

　　仪器分析

　　图D.1 样品提取、净化、分离及仪器分析流程图

　　附录E

　　(资料性附录)

　　二噁英类校准溶液系列示例

　　二噁英类校准溶液系列示例见表E.1。

　　表E.1 二噁英类校准溶液系列示例

　　序号 化合物简称 质量浓度(ng/mL) STD1 STD2 STD3 STD4 STD5 目标化合物 1 2,3,7,8-T4CDD 0.100 0.500 2.00 10.0 40.0 2 1,2,3,7,8-P5CDD 0.500 2.50 10.0 50.0 200 3 1,2,3,4,7,8-H6CDD 0.500 2.50 10.0 50.0 200 4 1,2,3,6,7,8-H6CDD 0.500 2.50 10.0 50.0 200 5 1,2,3,7,8,9-H6CDD 0.500 2.50 10.0 50.0 200 6 1,2,3,4,6,7,8-H7CDD 0.500 2.50 10.0 50.0 200 7 O8CDD 1.00 5.00 20.0 100 400 8 2,3,7,8-T4CDF 0.100 0.500 2.00 10.0 40.0 9 1,2,3,7,8-P5CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 10 2,3,4,7,8-P5CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 11 1,2,3,4,7,8-H6CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 12 1,2,3,6,7,8-H6CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 13 2,3,4,6,7,8-H6CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 14 1,2,3,7,8,9-H6CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 15 1,2,3,4,6,7,8-H7CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 16 1,2,3,4,7,8,9-H7CDF 0.500 2.50 10.0 50.0 200 17 O8CDF 1.00 5.00 20.0 100 400 提取内标 18 13C12-2,3,7,8-T4CDD 100 100 100 100 100 19 13C12-1,2,3,7,8-P5CDD 100 100 100 100 100 20 13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDD 100 100 100 100 100 21 13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDD 100 100 100 100 100 22 13C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDD 100 100 100 100 100 23 13C12-O8CDD 200 200 200 200 200 24 13C12-2,3,7,8-T4CDF 100 100 100 100 100 25 13C12-1,2,3,7,8-P5CDF 100 100 100 100 100 26 13C12-2,3,4,7,8-P5CDF 100 100 100 100 100 27 13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDF 100 100 100 100 100 28 13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDF 100 100 100 100 100 29 13C12-1,2,3,7,8,9-H6CDF 100 100 100 100 100 30 13C12-2,3,4,6,7,8-H6CDF 100 100 100 100 100 31 13C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDF 100 100 100 100 100 32 13C12-1,2,3,4,7,8,9-H7CDF 100 100 100 100 100 进样内标 33 13C12-1,2,3,4-T4CDD 100 100 100 100 100 34 13C12-1,2,3,7,8,9-H6CDD 100 100 100 100 100

　　附录F

　　(资料性附录)

　　样品自动净化系统淋洗过程和净化分离程序示例

　　将提取液(8.4.2)或经除硫(8.4.3.1)、GPC 净化(8.4.3.2)后的提取液注入样品定量环。首先用70 mL正己烷(6.5)、70 mL二氯甲烷-正己烷溶液Ⅲ(6.15)、50 mL甲苯(6.3)预淋洗净化系统，包括多层硅胶柱、硅酸镁柱、活性炭硅胶柱1 和活性炭硅胶柱2，然后将样品环中的提取液自动输送至多层硅胶柱中，按照仪器设定顺序依次用40 mL 正己烷(6.5)淋洗多层硅胶柱，140 mL 正己烷(6.5)淋洗多层硅胶柱、硅酸镁柱和活性炭硅胶柱1，50mL二氯甲烷-正己烷溶液Ⅲ(6.15)反向淋洗硅酸镁柱，60 mL 二氯甲烷-正己烷溶液Ⅲ(6.15)正向淋洗活性炭硅胶柱1，60 mL甲苯(6.3)反向淋洗活性炭硅胶柱1，最后用105mL甲苯(6.3)反向淋洗活性炭